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HM43 葡萄球菌乳胶凝集试剂盒(HM43 HKM? STAPH)

放大字体缩小字体发布日期:2010-08-04 来源:雷竞技电竞 整理 浏览次数: 188
葡萄球菌乳胶凝集检测试剂用于确证鉴定平板上分离出的可疑金黄色葡萄球菌菌落。

      一、用途

      葡萄球菌乳胶凝集检测试剂用于确证鉴定平板上分离出的可疑金黄色葡萄球菌菌落。该试剂盒仅供专业人员使用。

      二、原理

      乳胶颗粒表面包被有纤维蛋白原(与凝固酶相结合)和免疫球蛋白(与A蛋白相结合)。与金黄色葡萄球菌菌悬液混合后,乳胶颗粒可迅速凝集。缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌不会发生明显凝集。

      三、试剂盒组成成分 

      M43M433

      REAG TEST测试试剂M 43a 葡萄球菌乳胶试剂 5mL5×5mL

      乳胶颗粒包被有人类纤维蛋白原和免疫球。含0.099%的叠氮化钠防腐剂。(蓝色瓶盖)

      CONTROL +阳性对照试剂M43b 阳性对照  1mL2×1mL

      无活性的金黄色葡萄球菌,含0.099%的叠氮化钠防腐剂。(黑色瓶盖)

      使用说明书

      检测板

      搅拌棒

      需要的其它材料

      l接种环

      四、警告和注意事项

      安全:

      1、试剂仅供体外诊断使用。

      2、试剂盒作防腐剂使用的叠氮化钠可与铅或铜制品反应形成易爆的金属叠氮化物。可用大量水冲洗以避免叠氮化物的堆积。

      3、使乳胶试剂敏感的免疫球蛋白和纤维蛋白原从人类血浆中提取,经测试不含HIV-1, HIV-2HCVHbsAg抗体。但在使用过程中,依然应遵循潜在传染性产品的处理程序。

      4在处理或检测可疑致病菌时应采取适当的预防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸钠消毒处理30分钟。含酸的废液应作中和处理。

      5、阳性对照液在生产中已作惰性处理,但在使用过程中依然应遵循潜在传染性产品的处理程序

      检测过程:

      1、试剂盒应按说明书使用。

      2、所有试剂在使用前应达到室温。

      3、不要稀释试剂盒内的任何试剂。

      4、不要混合不同批次试剂盒的试剂。

      5、不要冷冻试剂盒内的试剂。

      6、不要使检测乳胶试剂的滴管接触到阳性对照试剂或细菌样品。

      7、注意凝集状态,呈凝乳状或纤维状可能为非真实凝集。

      8、使用前应确保检测板清洁干燥。

      五、贮存及保质期

      检测试剂盒不使用时应贮存在28℃,并应在包装盒标签上的有效期内使用检测试剂。

      六、样本

      初步分离平板,如5%的血平板,经3537℃培养1824小时后,选取12个金黄色葡萄球菌的可疑菌落,菌落应作纯度测试,以减少造成错误的可能性。必要时,可在另一平板中划线纯化菌落。菌落形态不典型时,可作革兰氏染色以提高测试菌落为葡萄球菌的可能性。

      七、检测过程

      雷竞技百科 控制:

      在每次使用检测试剂盒前应作下列雷竞技百科 控制检测,以确证试剂的有效性。

      1、阳性对照的控制:滴1滴阳性对照试剂(M43b)于一个测试反应环内,然后轻轻摇匀测试试剂(M 43a ),并滴1滴测试试剂于同一个测试反应环内,不要使检测乳胶试剂的滴管接触到阳性对照试剂。用搅拌棒在整个区域内混匀液体,轻摇检测板2分钟后,应观察到凝集现象。如果未出现凝集反应,应采用新鲜的检测试剂盒。

      2、阴性控制:滴1滴混匀的测试试剂(M 43a )于反应环内,取新鲜的已知的缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌(如表皮葡萄球菌)培养1824小时的单菌落,与反应环内的乳胶试剂混匀。摇动检测板2分钟,应无凝集发生。

      测试程序:

      1、轻轻摇匀乳胶测试试剂,滴1滴测试试剂于检测板的一个反应环内。

      2、用接种环从选择性分离平板上挑取可疑菌落,与反应环内的乳胶试剂混合并混匀。用1支干净的搅拌棒将混匀液在整个反应环内涂布均匀。

      3、轻摇检测板,在2分钟内观察凝集结果。

      4、记录结果后,将搅拌棒和检测板进行适当的消毒处理。

      八、结果说明

      2分钟内出现凝集,表明测试菌落为金黄色葡萄球菌,如不出现凝集,表明测试菌落即不是金黄色葡萄球菌,也不是其它具有凝固酶/A蛋白的葡萄球菌。

      九、使用的局限性

      1、结果应依据所有的临床或实验室信息进行判断。

      2、测试应为纯菌落,如果菌落不纯,可能造成错误的结果。

      3、培养超过30小时后,可能形成自凝。

      4、高盐培养基,如甘露醇氯化钠琼脂培养基,可抑制A蛋白的产生,可造成假阴性结果。

      5、葡萄球菌的粗糙菌株可引起假阳性结果。这类菌株较少见,并且可从菌落形态上加以区别。如果可疑时,可用生理盐水制成菌悬液并仔细观察菌悬液的流畅性。

      6、纤维状凝集可能为假阳性结果,应作进一步的生化鉴定。

      7、有些酵母菌株可能引起假阳性凝集结果。

      8、所有凝固酶阳性的葡萄球菌菌株可与葡萄球菌乳胶试剂反应。因此金黄色葡萄球菌不易与中间葡萄球菌和猪葡萄球菌区分开。但这两种菌株很少从人类分离出,一般在动物或腐生生物中存在。

      9、乳胶凝集检测为初步鉴定结果,所有的阳性结果的纯培养物应作进一步的生化鉴定分析。

      十、检测效果对比

      HKM?葡萄球菌乳胶试剂盒与一种已广泛使用的商业化的乳胶试剂盒检测效果对比,用二种商品检测121株金黄色葡萄球菌和其它葡萄球菌及56株潜在交叉反应的菌株。

      HKM?

      总计

      阳性

      阴性

      另一已广泛使用的乳胶试剂盒

      阳性

      63

      0

      63

      阴性

      0

      114

      114

      总计

      63

      114

      177

      灵敏度 63/63100%

      特异性 114/114100%

      一致性 177/177100%

      63株分离菌株中,9株在2种试剂盒均存在交叉反应。它们分别为:差异柠檬酸杆菌1株、鲍氏不动杆菌2株、斯氏普罗威登氏菌1株、蜡样芽孢杆菌2株、产酸克雷伯1株、链球菌1株。以上所有交叉反应的菌株中,均不会在葡萄球菌选择性分离平板上生长或生长时菌落不会呈现典型的葡萄球菌菌落形态。蜡样芽孢杆菌凝集时为非典型凝集(呈纤维状)

      十一、重复性

      批内重复性:通过以系列稀释度的参照抗原和试剂盒对照抗原及一组细菌样品对同1批产品的灵敏度和特异性进行检测。由不同的操作者随机测试3次,最终效价由参照/对照抗原测定,并且3次定性分析结果完全一致。

      批间的重复性:通过以系列稀释度的参照抗原和试剂盒对照抗原及一组细菌样品对 3 批产品的灵敏度和特异性进行检测。 3 个批次间,最终效价无显著差异及定性分析结果为 100% 一致性。

      广东环凯微生物科技有限公司 电话:020-32077703
      编辑:foodnews

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