报告基因的检测是评价启动子调控效率和其中作用元件的有效方法.经常使用的还有双报告系统: 同时向细胞中转入两种报告基因, 其中一种为待研究的启动子控制(荧火虫荧光素酶),另一种为不被处理所影响的启动子控制(海肾荧光素酶)作为内参,可消除系统误差.
报告基因检测的优势:
? 减小随机误差
? 比率计算避免了系统误差
? 超高的灵敏度 ( 极低的背景干扰)
? 动力学范围更广
? 发光强度在4~6个数量级之间与测定物质浓度间呈线性关系
? 无需昂贵的设备投入
? 手段更为灵活
2、化学发光免疫分析
3、核酸定量 (PCR Quantification)
4、酶活分析
5、活性氧分析
6、BRET分析
主要用来研究分子间相互作用,如:
? 蛋白组学
–监测蛋白-蛋白相互作用
–检测胞内细胞器间的相互作用
–在哺乳动物细胞中对酵母双杂交结果的验证
? 受体研究
? 细胞信号传导通路研究