一、实罐灭菌

1、将冷凝水管路断开，拔下电极，打开罐盖，将培养基装入发酵罐及补料瓶，易产生泡沫的培养基尽量不要超过两升。

2、连接管路：

取样管路连接，补料管路连接；
空气过滤器用硅胶管与罐盖空气管连接，并用弹簧夹夹紧；
排气口与过滤器用硅胶管连接；
安装温度电极、pH电极、溶氧电极，pH电极用们帽盖紧电极上端口，溶氧电极用铝铂纸包裹电极上端口，防止受潮。
盖紧其它罐盖接口。

3、提起玻璃罐体及补料瓶放入灭菌锅，盖好牛皮纸，盖好锅盖，确定发酵温度及时间。

4、灭菌结束后，尽快将罐放回原位并尽快通入空气。

二、发酵操作

1、将灭菌后的罐体放回原位，连接冷凝水管路，通入冷凝水，连接通气管路，调整通气量至3～5L/min。

2、将温度电极、pH电极、溶氧电极与控制器连接。

3、补料管连接：

打开补料蠕动泵防护盖，搬开进出口处的白色管夹，将硅胶管嵌入入口处的管夹并夹紧，用手转动泵头，将硅胶管沿凹槽安装直至出口处，开手动开关约十秒后夹紧出口处管夹，关手动开关；
将酒精棉球放在罐盖补料口内，将针头插入并穿透密封盖；
打开蠕动泵手动开关，使输液管中充满料液，置于自动状态。

4、酸碱液、消泡剂操作同补料操作。

5、接种：旋松接种口，在火焰保护下，打开接种口，倒入种子，旋紧接种盖，移去火焰圈。

6、开始发酵：

（1）打开控制器电源，按Alt＋F1键，输入密码，进入过程参数画面，设定发酵过程参数：

温度设定：
按F1进入温度设定，按F1输入设定温度并确认；
按F2选择控制方式，一般设定为自动，即恒温发酵，如选择顺控需设定顺控操作；
按F3输入手动输出百分比，最大为+100%，最小为-100%；
按F4输入输出极限；
按F5输入报警极限的上限与下限。
pH值设定：
pH值F1～F5设定同温度设定；
按F6选择是否联动，联动补料开时，补料1的控制权交给了pH参数，补料控制方式自动切换到手动状态，补料的控制周期同期为pH的控制周期；
转速设定：
手动输出为0～100%，其它与温度设定相同。
溶氧设定：
按F3进入串级设定，默认为转速，溶氧与转速串级时，原转速为手动状态时自动转换到自动跟踪状态，转速设定值不超出根据溶氧需要提供的极限设定范围，转速控制权交给溶氧；与空气串级时，情况相同；
其它设定同温度设定。
空气参数、压力参数设定同温度设定。

（2）按ESC键进入主菜单，按F2进入初始化菜单，按F1设定发酵批号并确认，再按F2发酵开始并确认。（不设发酵批号系统将不保存过程数据）

三、取样操作

先松开弹簧夹J2（发酵罐平衡口－取样罐平衡口），将取样管内残液混入发酵罐内，再夹紧J2，将出料管放入接料瓶，松开J3（取样管夹），发酵液被压入接料瓶，可减少排气加快取样速度，开J2、J3排出取样管内残料后放开J3、J2夹紧。