一．分光光度法是环境监测中常用的方法，分光光度法的主要特点：

(1) 灵敏度高；

(2) 准确度高：

(3) 适用范围广；

(4) 操作简便、快速：

(5) 价格低廉。

二．校正分光光度计波长的方法：

校正波长一般使用分光光度计光源中的稳定线光谱或有稳定亮线的外部光源，把光束导入光路进行校正，或者测定已知光谱样品的光谱，与标准光谱对照进行校正。

三．分光光度法测定样品时，选用比色皿应该考虑的主要因素：

(1) 测定波长。比色液吸收波长在370nm以上时可选用玻璃或石英比色皿，在370nm以下时必须使用石英比色皿；

(2) 光程。比色皿有不同光程长度，通常多用10.0mm的比色皿，选择比色皿的光程长度应视所测溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1～0.7之间为宜。

四．如何检查分光光度计的灵敏度：

灵敏度是反映仪器测量性能的重要指标，检查方法为：配制0.001％重铬酸钾溶液，用1cm比色皿装入蒸馏水作参比，于440nm处测得的吸光度应大于0.010。若示值＜0.010，可适当增加灵敏度的挡数，如仍不能达到该值，应检查或更换光电管。

五．在光度分析中，消除共存离子的干扰的方法：

(1) 尽可能采用选择性高、灵敏度也高的特效试剂；

(2) 控制酸度，使干扰离子不产生显色反应；

(3) 加入掩蔽剂，使干扰离子被络合而不发生干扰，而待测离子不与掩蔽剂反应；

(4) 加入氧化剂或还原剂，改变干扰离子的价态以消除干扰；

(5) 选择适当的波长以消除干扰：

(6) 萃取法消除于扰；

(7) 其他能将被测组分与杂质分离的步骤，如离子交换、蒸馏等；

(8) 利用参比溶液消除显色剂和某些有色共存离子干扰；

(9) 利用校正系数从测定结果中扣除干扰离子影响。

六．用分光光度法测定样品时，什么情况下可用溶剂作空白溶液?

当溶液中的有色物质仅为待测成分与显色剂反应生成，可以用溶剂作空白溶液，简称溶剂空白。

七．一台分光光度计的校正应包括哪4个部分?

波长校正：吸光度校正；杂散光校正；比色皿校正。

八．在光度分析中酸度对显色反应主要有哪些影响?

(1) 对显色剂本身的影响；

(2) 对溶液中各元素存在状态的影响；

(3) 对显色反应的影响。

九．简述朗伯-比尔定律A=kcL的基本内容，并说明式中各符号的含义：

朗伯—比尔定律是比色分析的理论基础，它可综合为光的吸收定律，即当一束单色光通过均匀溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。

式中：A—吸光度；k—吸光系数；C—待测物浓度；L—液层厚度。

十．简述在朗伯-比尔定律中，吸光系数与摩尔吸光系数的区别。

在朗伯-比尔定律A=kcL中，K是比例常数，它与入射光的波长、溶液的性质有关。如果有色物质溶液的浓度c用g／L表示，液层厚度以cm表示，比例常数众称为吸光系数。如果浓度c用mol／L表示，液层厚度以cm表示，则比例常数k称为摩尔吸光系数。摩尔吸光系数的单位为L／(mol·cm) ，它表示物质的浓度为1mol／L、液层厚度为1cm时溶液的吸光度。

十一．在光度分析中如何用镨钕滤光片对光度计的波长进行校正。

用特制的镨钕滤光片 (预先在精密度较高的仪器上进行校正过) 校正仪器波长时，通常用573nm和586nm的双峰谱线校正。

十二．在光度分析中如何选择显色剂。

(1) 显色剂的灵敏度要高；

(2) 显色剂的选择性要好；

(3) 所形成的有色化合物应足够稳定，而且组成恒定，有确定的组成比；

(4) 所形成的有色化合物与显色剂之间的差别要大；

(5) 其他因素如显色剂的溶解度、稳定性、价格等。

十三．在光度分析中共存离子的干扰主要的情况：

(1) 共存离子本身有颜色影响测定；

(2) 共存离子与显色剂生成有色化合物，同待测组分的有色化合物的颜色混在一起；

(3) 共存离子与待测组分生成络合物降低待测组分的浓度而干扰测定；

(4) 强氧化剂和强还原剂存在时因破坏显色剂而影响测定。

十四．在光度分析中引起偏离光吸收定律的原因：

(1) 由于入射光单色性差而引起偏离：

(2) 由于溶液中的化学变化而引起偏离 (待测物质离解、缔合) ；

(3) 由于介质的不均匀性而引起偏离。