1 目的

建立CO₂培养箱的使用与维修保养标准操作规程，确保操作人员正确使用。

2 范围

适用于CO₂培养箱的操作及维护保养。

3 定义

CO₂培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（37°C）、稳定的CO₂水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置，是细胞、组织、细菌培养的一种先进仪器，是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备。

4职责

设备使用人员执行本SOP。

5 程序

5.1 仪器结构

二氧化碳培养性由二氧化碳钢瓶和箱体组成。

5.2 使用操作规程

5.2.1 准备

(1)二氧化碳钢瓶出压变低时，提前采购，准备好备用品。

(2)每两周准备2-3L灭菌水或饱和硫酸铜溶液。

5.2.2 操作

(1)确认仪器设备处于正确的安装状态,确认电源、二氧化碳气体等连接正确。打开CO₂供气阀；注意CO₂供气必须是从减压阀输出，且压力维持在0.5～1bar，不能超过1bar。

(2)启动程序

启动前应打开电源开关，设置工作参数。（注意：新开启的培养箱压力传感开关在接通电源后2～3小时方能正常工作！）。

(3)运行程序,设置工作参数，按照实验要求的气体数值和温度，如37℃，5% CO₂，稳定后即可放入样品。

(4)运行设定程序。

5.3 清洁操作规程

5.3.1 每个月用75%酒精擦拭培养箱内不锈钢隔板和内胆，用手持紫外灯照射1小时。

5.4 维护保养操作规程

5.4.1 机器表面应经常清洁，保持干净。

5.4.2不用时，关闭程序，关闭气瓶，关闭电源。长期不用时应拔下电源插头。

5.4.3 箱体和附件清洁/灭菌（每月1次）。

5.4.4 用纯化水擦拭所有附件，用无纺布或纸擦干，再用75%的酒精喷洒消毒后擦干，确保内胆角落和顶部经过同样处理，再用手持紫外灯照射一小时。

5.4.5增湿盘换水或者饱和硫酸铜溶液（2周1次）。

5.5 填写记录

及时填写CO₂培养箱温度、CO₂浓度记录。

5.6 注意事项

5.6.1长期不用时关闭培养箱，应拔下电源插头，将托盘中的水或者饱和硫酸铜溶液倒出，清洁腔体，待干燥后再关门。

5.6.2 平时取送培养物时应尽量避免开门过大，尽量避免培养箱门被频繁开关，以免CO₂浓度、温度、相对湿度发生较大波动。