一、移液器内外部清洁方法
使用含肥皂液、洗洁精或60%异丙醇清洁液的湿布,去除移液器外部污垢,再用双蒸水淋洗,晾干即可。如果移液器误吸入样品被污染,需拆卸移液器的下半部分(详见移液器拆卸与组装),再使用肥皂液、洗洁精或60%异丙醇清洁,并用双蒸水淋洗干净,晾干后再组装。
特别提示:
移液器内部的密封圈是免维护的,无需拆卸,因而无需更换。
二、移液器的高温高压灭菌处理
实验中,需要用移液枪来移液,枪头灭菌了但枪不能灭菌,怎么实现无菌操作?要移的液体量只有几十微升用移液管不好实现,主要是担心枪里面的无菌情况,在吸打时空气是直接接触液体的。
有可以灭菌的移液枪:
去除移液器内部和外部的污染物
用灭菌袋、锡纸或牛皮纸等材料包装灭菌部分,于121℃,1MPa下,灭菌15-20分钟;灭菌完成后,将移液器冷却至室温,晾干,安装即可。
特别提示
1.灭菌时,确保温度不超过121℃;
2.进行高温高压或紫外照射灭菌时,请勿使用任何额外的消毒剂、清洁剂或次氯酸钠。
没有可以灭菌的移液枪:
1.可以用紫外线进行照射,表面灭菌还可以。
2.枪头灭菌,移液枪70%酒精擦拭。移液时注意慢吸快打,移液量不超过枪头2/3即可。
3.可以在枪头上部塞上脱脂棉再去灭菌,然后再使用。
4.用移液枪的问题关键在于要求的无菌级别高低以及操作的规范和熟练程度。现在做活菌计数就用移液枪做梯度稀释,没有问题很少有杂菌污染。
建议:
1.移液枪可以浸泡在75%酒精中过夜,甚至更长时间;
2.移液时枪尽量不要碰到器皿壁;
3.最好在超净工作台上操作,超净工作台内的空气可以认为是无菌的,这样吸进枪管中的空气很少,可以认为样品不会被污染;
4.操作熟练程度关系实验成败,建议先用普通肉汤培养基,和其他非实验菌进行操作练习,熟练后再进行正式试验。
5.关键是灭菌的tip头是要有脱脂棉的tip头,然后对移液枪进行表面消毒就行了。
6.其实不用那么麻烦,可以将一般的移液枪放在超净台中,打开紫外灯灭菌半小时,使用时先将移液枪用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精灯火焰上2cm左右处将移液枪反复吹打几次即可。
7.移液枪放置在超净台中和台子一起紫外灭菌半小时;枪身用75%酒精擦拭;枪头塞入脱脂棉一起灭菌;这样使用应该没问题。
8.枪头是经过高压消毒的,直接接触液体的是枪头又不是别的,剩下的无非就是无菌操作的问题了,紫外线消毒移液枪就足够了。
三、移液器的日常维护保养
根据经验针对移液器推荐下列使用保养方法:
1、日常消毒,用70%酒精棉球擦拭移液器杆柄表面。使移液器末端(a端)稍低于手持端(c端)并使金属推杆在下方(如图),使用吸满酒精的棉球,还能够保证移液器的金属退杆内面被酒精覆盖、消毒。按动金属退杆同时擦拭被退杆末端(a处)环柄包住的部分。对重要实验若需更加仔细消毒,可将金属退杆拔下,彻底擦拭消毒。
2.不定期将金属退杆拔下,将白色塑料杆柄从b处拧下,用酒精棉球清理杆柄内部。此时可能需要使用钝头铁丝等挟持小棉球以便够著末端较细的部位。
3、使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常;
4、当移液器吸嘴内有液体时,严禁将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;
5、使用正确的方法安装吸头,切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头。