氯霉素检测试剂盒可定性、定量检测动物组织（含水产）、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样品中氯霉素的残留

一、概要
氯霉素 （Chloramphenicol,CAP）曾是应用广泛的抗菌素，但由于其存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
氯霉素检测试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，操作时间仅需45min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。

二、试验原理
氯霉素检测试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被氯霉素抗体，样品中残留的氯霉素和酶标氯霉素抗原竞争微孔条上预包被的抗体，经TMB底物显色，样品吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。

三、交叉反应率
氯霉素………………………………………………………100％
氯霉素碱……………………………………………………0.5％
甲基氯霉素……………………………………………≤0.05％
氟苯尼考…………………………………………………<0.01%
氟苯尼考胺………………………………………………<0.1%
*注：标准品浓度为0ppb,0.05ppb,0.15ppb,0.45ppb,1.35ppb,4.05ppb

四、操作步骤：
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号：将样品/标准品对应微孔按序编号，并记录标准孔和样品孔所在的位置。
5、加标准品/样品：加标准品/样品70l到对应的微孔中，再加入氯霉素酶标物30l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。
6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300l/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
7、显色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15～20min。
8、测定：加入终止液50l/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。

五、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.05ppb
样品最低检测限：
组织样品……………………………………………0.1ppb
牛奶………………………………………………0.05ppb
饲料……………………………………………0.2ppb
蛋…………………………………………………………0.05ppb
蜂蜜…………………………………………………0.05ppb
回收率：
组织样品……………………………………………… 102±15%
牛奶………………………………………………… 110±10%
饲料………………………………………………………93±10%
蛋………………………………………………………95±15%
蜂蜜………………………………………………………80±10%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%

六、注意事项
1、室温低于20℃或试剂及样品没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件:保存试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象
发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。
9、该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

七、贮藏条件及保存期
贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。
保存期：该产品有效期为12个月。