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移液枪的分类和工作原理
气体活塞式移液枪
工作原理：通过弹簧的伸缩运动，推动活塞，排除部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排除液体。
塞式移液枪
工作原理：通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体，活塞和液体直接接触，没有空气柱，适用于密度、黏度与水不同的液体，如易挥发性溶液、粘稠液体等。
移液枪使用诀窍
气体活塞式移液枪
1影响移液枪精度因素
(1)温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差。
(2)气密性：吸头和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差。
(3)吸速：容易造成吸头内气泡产生，而且会污染枪头。
(4)试剂的挥发：吸挥发性高的试剂时，蒸汽进入枪头，内压增高，结果在压出液体时，压力变大，而产生误差。解决办法：反复抽吸4-5次就可改善。
2具体使用方法
更换tip法：最精确。
(1)调节旋钮到所需刻度位置，诀窍：首先可略超过一些，再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度，避免人为误差。
(2)插上tip:无菌操作时，要注意动作迅速正确，不能用手碰tip，动作的力度要保持一致，禁止废动作。普通操作时，可用拇指食指上紧，但手不能碰tip尖端处。
(3)指压到第一段，tip尖端接触试剂。白色tip进到液面1 mm一下，黄色吸头 2-3 mm，蓝色吸头2-4 mm，避免液压的影响造成的误差。
(4)缓慢吸试剂，禁止速度过快，液体进入枪头。
(5)移出吸头后，先在容器内壁轻轻靠住，使吸头外壁液体流下。
(6)将吸头贴在目标容器内壁，轻轻按到第一段，压出液体。
(7)吸头尖端在容器内壁略上滑动，保留尖端少量液体，移出目标容器，手指卸掉吸头，注意不要使试剂溅出。
一只吸头分注法：不适用于挥发性，有毒性试剂。
(1)同上述A-D，移出液面后，先缓慢按到第一段，在用力按到第二段，将试剂全压出。
(2)同上述C，缓慢吸出液体。
(3)在目标容器液体上空，压出试剂到第二段，注意压的力度要和A相同，还应注意试剂不要四处飞溅。
(4)缓慢返回第一段，可重复上述操作。达到目标容器原有液体不污染吸头的目的。
转移数ul的贵重试剂时的方法：
(1)同上述A-D，移出液面后，在容器内壁轻按几下，使外壁液体流下。白色吸头进到液面1 mm以下，这最重要。
(2)tip尖端浸入目标容器的液面下，缓慢压到第一段。
(3)松开，返回到第一段，重新吸入液体，反复4-5次，，洗净吸头内壁液体。
(4)将吸头尖端移出液面，在内壁轻轻靠住，压出液体到第二段。
移液枪使用注意事项，要注意以下几点：
1. 正确选择移液枪与吸头组合量程
空气柱的体积越小，误差越低。
2. 吸头的浸没深度
吸头尽量浸没得浅一些，防止液体残留在吸头表面，但是同时要浸没得足够深防止吸取空气。
3. 垂直吸取液体
移液时角度不同，液体压力也会改变。
4. 预润湿
通过预润湿，使得空气柱充满饱和的液体分子，至少预润湿3次，使得空气柱里的液体分子达到饱和。
5. 正确的放液操作
放液时，吸头尖靠在容器内壁，完全打出，排出最后的液滴;体积低于10ul直接放液到容器底部。
6. 缓慢、匀速的吸放液体，保证结果的精确性。
移液六部曲
1. 装吸头
移液器套柄用力下压，需要时小幅度旋转即可。
错误操作：用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损，从而影响其密封性。
2. 量程设定
操作之前请先选择正确的移液器，移液器可在10-100%量程范围内操作，但在10%量程处操作对于移液技巧要求高，故推荐在35-100%量程范围内操作。
量程调节：当由小量程调节至大量程时，朝所需量程方向连贯旋转，旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时，直接连贯旋转至所需量程。
3. 润洗
用同一样品重复吸液排液二至三次，润洗为以后每次吸液提供相同的接触面，保证操作的一致性。
注意：高温或者低温液体请不要润洗!
4. 吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态，倾斜角度不能超过20°。
5. 吸头浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。
6. 吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开，这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7. 吸液速度
匀速连贯移液，控制好移液速度，太快会造成喷液，液体或者气雾冲入移液器内部，污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先将活塞按至第一档排液，略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式：沿内壁、在液面以上、在液体表面、液面下。
9. 手温
移液器不宜长时间握在手里，不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
移液枪的维护保养
一
密封性检查
1.仪器测漏
2.简单目测法
1)200uL及以下的移液器，吸液后将吸头浸入液面1-2mm，静待20秒，观察吸头内部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器，吸液后将吸头移出液面，朝下垂直静置15-20秒，观察是否有液体下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清洁：
日常清洁剂(专业清洗剂，肥皂液，洗洁精等)擦洗，然后用纯水淋洗，晾干即可 。
内部清洁：
1)下半部分拆卸下来。
2)塑料部件(套柄等)采用与外部清洁一致的方式即可。
3)活塞清洁可用纯水(或先用异丙醇冲洗再用纯水洗净)，晾干， 然后在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的硅酮油脂。
注：移液器主体密封部分，大多是免维护的，不能轻易拆卸。
二
移液器的故障分析解决
问题 |
可能原因 |
解决方法 |
吸头漏液或分液体积不准确 |
吸头松脱或吸头不匹配 |
插紧吸头；更换匹配的吸头 |
移取粘稠、易挥发性或与水密度有明显差异的液体 |
预润湿吸头数次 |
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移液过快 |
缓慢移动控制按钮，慢吸慢放 |
|
吸头离开液面过快 |
在液面下停留3秒钟，再缓慢移出吸头 |
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活塞被污染或损坏 |
清洁或更换活塞 |
|
移液枪吸嘴损坏 |
更换移液枪下半部分零件或通道 |
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控制按钮移动困难，发涩。 |
活塞被污染 密封圈污染 移液枪堵塞 |
清洁移液枪下半部分 更换过滤芯 |
安装吸头时吸嘴无弹性伸缩 |
锁定环取消了弹簧加载 |
取下锁定环 |
文章（文字）来源：网络
