马铃薯营养丰富,耐储。生育期短,增产潜力大,为人们喜食。但马铃薯易感染多种病毒,导致薯块变小、畸形、种薯退化等。实验证明,利用茎尖组织培养结合病毒检测,进行马铃薯脱毒,进而生产脱毒种薯用于生产,可有效地防止种薯退化,大幅度提高马铃薯产量。其主要脱毒方法如下:
1.取材和消毒将欲脱毒地品种块茎催芽,芽长4-5cm时,剪芽并剥去外叶,自来水下冲洗40min,于无菌室内用漂白粉溶液消毒后,无菌水冲洗2~3次。
2.剥离和接种在无菌室内,于40倍地解剖镜下,剥取带1个叶原基地茎尖,接种于MS茎尖培养基地试管中。试管中的MS茎尖培养基包括大量元素、微量元素、有机成分和生长素、细胞分裂素、蔗糖和琼脂,pH值为5.7,经高压灭菌后使用,每试管接种1个茎尖。
3.培养条件接种的茎尖培养于25C、1500-3000LX光照条件下培养室内,3个月则长成3-4片叶的小植株。在无菌条件下,进行切段扩繁一次,取部分苗进行病毒检测。
4.病毒检测病毒检测是茎尖脱毒不可缺少的步骤,常用鉴别寄主即指示植物或血清学方法进行检测,及时淘汰血清学阳性反应或在指示植物上有症状的茎尖苗,无任何反应的茎尖苗即脱毒苗用作繁殖。