AMAMFSAc05022 奶油 巧克力 乳蛋白 凯氏定氮法
AM-AM-FS-Ac-05022
奶油巧克力中的乳蛋白
1 适用范围
不适用于受到高热处理的含乳蛋白的巧克力制品。
2.试验过程
称量10.0g细碎的奶油巧克力，加入250ml或再大些的离心瓶中，用约100ml乙醚萃取两次，通过振荡至均匀，离心后倾滗上层乙醚层。瓶子上塞上带弯头玻璃管和直玻璃管的两孔塞，其中直管伸至距底部1/3处。将瓶子放在温热 (不是烫热)的地方，同时通过弯管抽气使瓶中吸入适度空气流以排除乙醚。当乙醚被排出后，移取100mlH2O加入到瓶中。塞住，充分振荡4min，移入100ml 1%Na2C2O4溶液。塞住，充分振荡3min，让其静置约10min，然后再振荡1-2min。高速 (每分钟约1800转)离心约15min。
倾滗上层清液于烧杯中。移取100ml清液到干燥的250ml烧杯中，并轻轻搅拌的同时加入1ml HOAC。让其静置几分钟后，沉淀可部分沉降，搅拌下加入4ml 10%的单宁酸溶液(溶液配制后不能超过1周)。让其沉降几分钟；在7cm瓷漏斗上适度抽气过滤。过滤液应该是清晰的。用S&S589白色螺条滤纸(或同类滤纸)过滤，在滤纸上覆盖一层纸浆。纸浆是由一条15cm长的Whatman1号滤纸撕碎与水一起捣制而成。在淀帚帮助下，用洗涤溶液(100ml 1% Na2C2O4溶液中加入1ml HOAc和2ml 10%单宁酸溶液)将所有的沉淀转移到漏斗中。在过滤漏斗上洗1到2次。用刮勺松开漏斗周围边缘，小心卷起并移取滤纸和沉淀，放入长颈烧瓶中。用数片潮湿滤纸将粘附于漏斗或刮勺上的沉淀颗粒转移到烧瓶中。按33-24C测定N。
N×2×6.38=用于分析的10g样品中的酪蛋白和清蛋白总数。
酪蛋白和清蛋白×1.07=总的乳蛋白。
3.来源
AOAC 官方方法939.02第17版