即将供血者的红细胞与受血者的血清（主侧）及受血者的红细胞与供血者的血清（次侧），分别做配血试验，观察有无凝集反应。前者称为交叉配血的主侧，后者为次侧，因为最常见的严重溶血反应，多因受血者血清中的血型抗体（凝集素）作用于输入红细胞膜上的血型抗原而引起，并非因输入血清中的血型抗体作用于受血者的红细胞所致。由于输入的血型抗体可被受血者的血浆稀释，并可被固定组织抗原中和而失效。故临床上配血，主要检查供血者红细胞膜上的血型抗原与受血者血清中的血型抗体是否发生凝集反应。交叉配血的两侧均无凝集反应，为配血相合，可以输血。主侧出现凝集反应，为配血不合，不能输血，主侧无凝集反应，次侧出现凝集反应，为配血基本相合，在紧急情况下才可输血，但要特别慎重，不可输得太快、太多，并密切观察有无输血反应。输血时不仅要鉴定ABO血型和Rh血型，即使输入同型血，或受血者再次接受同一供血者的血液，都必须做交叉配血试验。因人类的血型很复杂，目前已发现有15个血型系统，即使是同型血，还有亚型的差别，如受血者需大量输血时，尚需做献血者之间的交叉配血试验。