VIP标识 上网做生意,首选VIP会员| 设为首页| 加入桌面|| 手机版| RSS订阅
雷竞技电竞
,关注食品安全,探讨食品技术

PRINS步骤

放大字体缩小字体发布日期:2006-07-06 浏览次数: 168
      1、常规脱蜡浸入0.01mol/LPBS;
      2、用0.2mol/L盐酸处理5min;
      3、蛋白酶K(25μg/m1)消化37℃ 15min;
      4、分别用80%,95%和100%酒精脱水,室温干片;
      5、加PCR混合液25μL(10mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,1.5mmol/L MgCl2,各加200μmol/L dATP,dCTP,dGTP,1.5mmol/L dig-11-dUTP l.5μl,引物250ng,Taq DNA聚合酶2U),加盖片;
      6、94℃变性5min后置入65℃湿盒中5min;
      7、用0.1×SSC液,65℃洗5min;
      8、片于65℃ 10s~20s;用4×SSC-0.1%吐温20液42℃洗5min,2次;
      9、经Buffer I液洗后滴加20%羊血清封闭30min;
      10、加地高辛抗体复合物(1:500)室温下2h;
      11、BufferⅢ液洗5min;
      12、用BCIP-NBT显色1h~2h,在镜下控制,终止显色;
      13、用中性红或核固红衬染,酒精脱水,二甲苯透明,树脂封片。


      推荐图文
      推荐食品专题
        点击排行
        Processed in 0.140 second(s), 18 queries, Memory 0.92 M
        Baidu
        map