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常用的电泳缓冲液

放大字体缩小字体发布日期:2006-07-07

      缓冲液

      使用液

      浓贮存液(每升)

      tris-乙酸(tae)

      1×:0.04mol/l tris-乙酸

      50×:242g tris碱

      0.001mol/l edta

      57.1ml冰乙酸

      100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      tris-磷酸(tpe)

      1×:0.09mol/l tris-磷酸

      10×:10g tris碱

      0.002mol/l edta

      15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

      40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      tris-硼酸(tbe)a

      0.5×0.045mol/l tris-硼酸

      5×:54g tris碱

      0.001mol/l edta

      27.5硼酸

      20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

      碱性缓冲液b

      1×:50mmol/l naoh

      1×:5ml 10mol/l naoh

      1mmol/l edta

      2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

      tris-甘氨酸c

      1×:25mmol/l tris

      5×:15.1g tris

      250mmol/l 甘氨酸

      94g 苷氨酸(电泳级)(ph8.3)

      0.1% sds

      50ml 10% sds(电泳级)

      说明:

      ①tbe溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。

      以片都以1×tbe作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。

      进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×tbe以提供足够的缓冲容量。

      ②碱性电泳缓冲液应现用现配。

      ③tris-甘氨酸缓冲液用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。

      2×sds凝胶加样缓冲液:

      100mmol/l tris·hcl(6.8)

      200mmol/l二硫苏糖醇(dtt)

      4%sds(电泳级)

      0.2%溴酚蓝

      20%甘油

      不含dtt的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。



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