病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于：①从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病；②用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型；③测定抗病毒血清或抗毒素效价；④新分离病毒的鉴定和分型，中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行，亦可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。
在细胞培养上进行病毒中和试验，近年来多采用空斑减少法。先将病毒稀释成适当浓度，使每0.2ml含80个～100个PFU（空斑形成单位），与不同稀释度的待检血清等量混合，置
表 空斑减少法中和试验示例
|
血清稀 释倍数[1] |
1:16 (4-2) |
1:64 (4-3) |
1:256 (4-4) |
1:1024 (4-5) |
1:409 (4-6) |
不加 血清 对照 |
中和抗 体价[2] |
|
|
待检血清A |
空斑数 |
3 |
13 |
38 |
51 |
53 |
55 |
4-3.6=1:140 |
|
空斑减少率 |
95％ |
76％ |
31％ |
7％ |
0％ |
|||
|
待检血清B |
空斑数 |
－ |
8 |
25 |
51 |
56 |
55 |
4-4.1=1:290 |
|
空斑减率数 |
－ |
85％ |
54％ |
7％ |
0％ |
|||
|
待检血清C |
空斑数 |
－ |
－ |
6 |
22 |
44 |
55 |
4-5.2=1:1300 |
|
空斑减少率 |
－ |
－ |
89％ |
59％ |
19％ |
|||
注：[1] 血清用4倍递增稀释；
[2] 空斑减少50％的血清稀释度，其计算法同LD50的计算。