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western blotting的一些细节-1

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-06-27
匀浆缓冲液的问题:
蛋白质的匀浆缓冲液的一般配方都是大同小异,里面有那么多试剂,我对其中一些试剂的功能做了查寻:
PMSF:蛋白酶抑制剂
EDTA:金属离子螯合剂
DTT:保证蛋白SH基团不被氧化
矾酸钠:酪氨酸磷酸酶抑制剂
所以匀浆缓冲液的蛋白酶抑制剂保护剂对于保护蛋白雷竞技百科 是非常重要的。
蛋白匀浆以后是否还会降解?
一般认为蛋白质匀浆以后,由于蛋白质变性,所以不会容易降解。而且不会受反复冻融的影响。但实际上蛋白样品反复冻融几次后,蛋白量会明显减少。所以最好不要使匀浆后的蛋白反复冻融,并且最好不要比较不同批次匀浆的蛋白样品。
 
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