Hoechst 33342/PI双染色法

1．悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml；帖壁生长的细胞用含有0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶消化成单细胞悬液，离心，弃上清，用1ml全培养液重悬细胞，加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml，37℃孵育7～10min。
2．4℃ 500～1000r/min离心弃去染液。
3．加入1.0ml PI染液，4℃避光染色15min。
4．400目的筛网过滤1次。
5．流式细胞仪分析。