一、保证采样器具的无菌性

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，导致玻璃器皿易裂纹而报废）。

2.取样筐：使用前要用 75%酒精进行喷洒消毒

3.取样勺、浓奶取样提子：要保证其清洁消毒，清洁后用 75%酒精进行擦拭消毒。

4.取样袋：可现用酒精进行擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，（包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。

5.电子称表面用 75%酒精消毒。

二、人员操作

1.保证手部的清洗、消毒：取样前及做样前都要先洗手再消毒。

2.取样要具有代表性（随机样、目的样、综合样）且要标示清楚。

3.取样完毕，不可在车间逗留，要及时将样品放入超净台，对其外表面进行紫外灯照射消毒。

4.在要求的做样区域进行操作。

5.做样前，要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒，再开口。

6.往盐水瓶加样品时，要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7.样品计量要准确，稀释倍数也要准确（1mL 吸管不允许将管口敲掉），进行 100 倍稀释时，1mL 吸管要伸入盐水中，不可以将样品管壁流下去，同时要避免将管底部捅破。

8.盐水温度以 40℃左右为宜，不能过热，将部分微生物烫死，也不能温度太低，不能将奶粉溶解完全。

9.进行稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。

10.倾倒平皿时，要注意培养基瓶口不要接触到平皿；倾倒的培养基要适量，不可以太少，在培养过程中干掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右为宜。

11.做大肠菌群样时，要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好，放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。

12.接二步时，要注意先将接种针（环）进行冷却，避免出现接不上菌落的情况发生，导致无法判断、确认。

13.做样完毕，及时放入相应培养箱进行培养，并清理清洁超净台。