第一法冷原子吸收法

一、目的与要求：

1、掌握用分光分度计测定总汞的方法

2、初步掌握用冷原子吸收法测总汞的方法

二、原理：

汞蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用，样品经过硝酸—硫酸或硝酸－硫酸—五氧化二钒消化使汞转为离子状态，在强酸性中以氯化亚锡还原成元素汞，以氮气干燥清洁空气作为载体，将汞吸出，进行冷原子吸收测定，与标准系列比较定量。

三、试剂与仪器：

1、硝酸

2、硫酸

3、30％氯化亚锡溶液：称取30克氯化亚锡(Sncl₂·2H₂0)加少量水，再加2ml硫酸使溶解后，加水稀释至100ml，放置冰箱保存。

4、无水氯化钙，干燥用。

5、5N混合酸液：量取10ml硫酸，再加人lOml硝酸，慢慢倒人50ml水中，冷后加水稀释至100ml。

6、五氧化二钒。

7、5％高锰酸钾溶液：配好后煮沸10分钟，静置过夜，过滤，棕色瓶中。

8、20％盐酸羟胺溶液。

9、汞标准溶液：精密称取0.1354克于干燥器干燥过的二氯化汞，加5N混合酸溶解后移入100ml容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1mg汞。

10、汞标准使用液：吸取1.0ml汞标准溶液，置于100毫升容量瓶中，加5N混合酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1ug汞，再吸取此液1.0，置于lOOml容量瓶中，加5N混合酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.lug汞，用时现配。

11、消化装置一套。

12、测汞仪。

13、汞蒸气发生器。

14、抽气装置。

四、操作方法：

(一)样品消化

1、回流消化法。

(1)、粮食或水分少的食品：，称取10克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加45ml硝酸，lOml硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化，装上冷凝管后，小心火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后，加热回流2小时。如加热过程中溶液变棕色，再加5ml硝酸，继续回流2小时，放冷后从冷凝管上端小心加20ml水，继续加热回流10分钟，放冷，用适量水冲洗冷凝管，洗液并入消化液中，将消化液经玻璃棉过滤于lOOml容量瓶内，用少量水洗锥形瓶，滤器，洗液并入容量瓶内，加水至刻度混匀，取与消化样品相同量的硝酸、硫酸，按同一方法做试剂空白试验。

(2)植物油及动物油脂：称取5.0克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加入7m1硫酸，小心混匀至溶液颜色变为棕色，然后加40ml硝酸，装上冷凝管后，以下按(1)自“小火加热”起依法操作。

(3)薯类、豆制品：称取20克捣碎混匀的样品(薯类须预先洗净晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30ml硝酸、5ml硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化，装上冷凝管后，以下按(1)自“小火加热”起依法操作。

(4)肉、蛋类：称取10克捣碎混匀的样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃数粒及30ml硝酸，5m1硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化，装上冷凝管以下按自(1) “小火加热”起依法操作。

(5)牛乳及乳制品：称取20克牛乳或酸牛乳，或相当于20克牛乳的乳制品(2.4克全脂乳粉，8克甜炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30ml硝酸，牛乳或酸牛乳加10ml硫酸，乳制品加5m1硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按(1)“小火加热”起依法操作。

2、五氧化二钒消化法

本法适用于水产品、蔬菜、水果。

(1)取可食部分、洗净，晾干、切碎、混匀，取2.50克水产品或l0克蔬菜，水果，置于50-lO0ml锥形瓶中，加50mg五氧化二钒粉末，再加8m1硝酸，振摇，放置4小时，加5m1硫酸，混匀，然后移至140℃砂浴上加热，开始作用较猛烈，以后渐渐缓慢，待瓶口基本上无棕色气体逸出时，用少量水冲洗瓶口，再加热5分钟，放冷。加5ml 5％高锰酸钾溶液，放置4小时(或过夜)，滴加20％盐酸羟胺溶液使紫色褪去，振摇，放置数分钟，移入容量瓶中，并稀释至刻度，蔬菜、水果为25ml，水产品为100ml。

取与消化样品相同量的五氧化二钒，硝酸，硫酸按同一方法进行试剂空白试验。

(二)测定

1、用回流消化法制备的样品消化液

(1)、吸取10.Oml样品消化液，置于汞蒸气发生器内，连接抽气装置，沿壁迅速加入2m130％氯化亚锡溶液，立即通人流速为1.5升／分的氮气或经活性炭处理的空气，使汞蒸气经过氯化钙干燥管进入测汞仪中，读取测汞仪上最大读数，同时做试剂空白实验。

(2)吸取0.00，0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ML汞标准使用液(相当0、 0.01、0.02、0.03、0.04、0.05ug汞)置于试管中，各加10ml l5N混合酸，以下按测定(1)自“置于汞蒸气发生器内”起依法操作，绘制标准曲线。

(3)计算：

X=((A₁-A₂)×1000)/( m×V₂/V₁×1000)

X：样品中汞的含量，mg／kg；

A_l：测定用样品消化液中汞的含量，ug；

A₂：试剂空白液中汞的含量，ug；

M；样品雷竞技百科 ，g；

V_l：样品消化液总体积，ml;

V₂：测定用样品消化液体积，ml。

2、用五氧化二钒消化法制备的样品消化液

(1)吸取10.Oml样品消化液，以下按回流消化法的测定(1)的方法操做。

(2)吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml汞标准使用液(相当0、

0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ug汞)，置于6个50ml容量瓶中，各加lmll：1)硫酸、lmll5％高锰酸钾溶液，加20ml水，混匀，滴加20％盐酸羟胺溶液使紫色褪去，加水至刻度混匀，分别吸取10.Oml(相当0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10ug汞)，以下按回流消化法(1)自“置于汞蒸气发生器内”起依法操作，绘制标准曲线。

(3)计算同前。

第二法双硫腙法

一、原理：

样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与双硫腙生成橙色络合物，溶于三氯佐烷，与标准系列比较定量。

二、试剂与仪器：

1、硝酸

2、硫酸

3、1N硫酸：量取5m1硫酸、缓缓倒入l5Oml水中，冷却后加水至180ml。

4、5％硫酸：量取5ml硫酸，缓缓倒入90ml水中，冷却后加水至98ml。

5、氨水。

6、溴麝香草酚蓝指示液：0.1％乙醇溶液。

7、20％盐酸羟胺溶液：吹清洁空气，可使含有的微量汞挥发除去。

8、三氯甲烷：不应含有氧化物。

9、双腙硫溶液：同食品中铅的测定方法。

10、双腙硫使用液：同铅的测定方法。

11、汞标准溶液：精密称取0.1354克经干燥器干燥过的二氯化汞，加1N硫酸使其溶解后，移入lOOml容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1ml汞。

12、汞标准使用液：吸取1.Oml汞标准溶液，置于lOOml容量瓶中，加1N硫酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于lOug汞。再吸取此液5.Oml于50ml容量瓶中，加1N硫酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1ug汞。

13、消化装置

14、分光光度计

三、操作方法：

(一)样品消化

1、粮食或水分少的食品：称取20克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及80ml硝酸、15ml硫酸、转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后加热回流2小时。如加热过程中溶液变棕色，再加5ml硝酸，继续回流2小时，放冷，用适量水洗涤冷凝管，洗液并入消化液中，取下锥形瓶，加水至总体积为150ml。取与消化样品相同量的硝酸，硫酸按同一方法做试剂空白试验。

2、植物油及动物油脂：称取10克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及15ml硫酸，小心混匀至溶液变棕，然后加入45ml硝酸，装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

3、蔬菜、水果、薯类、豆制品：称取50克捣碎混匀的样品(豆制品直接取样，其他样品取可食部分洗净，晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸，15ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化，装上冷凝管后，以下按l自“小火加热”起依法操作。

4、肉、蛋、水产品：称取20克捣碎混匀样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸，15ml硫酸，装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

5、牛乳制品：称取50克牛乳、酸牛乳，或相当于50克牛乳的乳制品(6克全脂乳粉，20克甜炼乳，12.5克淡炼乳)置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸、牛乳、酸牛乳加15ml硫酸，乳制品加lOml硫酸装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

(二)测定

1、取1-5消化液(全量)，加20ml水，在电炉上煮沸10分钟，除去二氧化氮等，放冷。

2、于样品消化液及试剂空白液中各加5％高锰酸钾溶液至溶液呈紫色，然后再加20％盐酸羟胺溶液使紫色褪去，加2滴麝香草酚蓝指示液，用氨水调节PH，使橙红色变为黄色(PHl—2)定量转移至125m1分液漏斗中。

3、吸取0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oml汞标准使用液(相当于0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oug汞)，分别置于125m1分液漏斗中，加lOmll5％硫酸，再加水至40ml混匀。再各加lml20％盐酸羟胺溶液，放置20分钟并时时振摇。

4、于样品消化液，试剂空白液及标准液振摇放冷后的分液漏斗中加5.Oml双硫腙使用液，剧烈振摇2分钟，静置分层后，经脱脂棉将三氯甲烷层滤人1cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点。在波长490nm处测光度，标准管吸光度减去零管吸光度，绘制标准曲线。

计算：

X=((A1-A2)×1000)/( M×1000)