二、紫外可见分光光度计的工作原理

1、紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。

2、紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。

三、首次使用紫外可见分光光度计人员须知

1、首次使用紫外可见分光光度计的人员，一般来说，一定要详细阅读仪器安全操作手册，否则严禁操作仪器。准备操作仪器前，需要先查看一下指针仪器在断电的情况下，表面指针是否指向零刻度。如若不是，理应先调零然后才能连接电源。在使用的过程中，操作员应该尽量避免对镜灯的触碰，放大器使用过后，一定需要把档位归置到零。

2、除此之外，在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂，因为这是非常重要的。通常情况下，干燥剂有效时，仪器的工作是不会出现任何问题的。可是当干燥剂失效之后，所出现的问题是非常严重的。除了仪器上面显数不准之外，很容易使反射镜变得污秽，从而使得光线率不准确。因此，日常使用仪器时，一定要注意干燥是否有效。当发现失效后，要及时进行更换。

四、分光光度计使用注意事项

1、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2、笔式PH计测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。
3、比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
4、实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。

五、紫外可见分光光度计出现问题处理方法

1、仪器电源接通后，光源不亮。

原因：

①光源灯泡已损坏。

②保险管烧坏。

处理方法：

①更换氘灯或钨灯。

②更换保险管。

2、紫外可见分光光度计噪音较大。

原因：光源灯泡使用时间超过寿命期。

处理方法：更换光源灯泡。

3、自检时提示波长自检出错。

原因：自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子。

处理方法：关上仪器样品室盖子，重新自检。

4、仪器自检时提示通讯错误。

原因：仪器与电脑之间的数据线没有连接好。

处理方法：连接好数据线，重新打开仪器和软件，重新自检。

5、仪器零点飘忽不定，主要反映在简易仪器上。

原因：在简易仪器中，零点往往是通过电位器来调整，这种电位器一般是炭膜电阻制作的，使用久了往往造成接触不良。

处理方法：更换电位器。

6、在使用过程中，出现数字显示不能归零，同时伴有图线记录基线位置偏高。

原因：

①光电倍增等老化，性能降低。

②信号处理板可能发生故障。

③前置放大版出现故障，引起反馈量增大。

处理方法：

①开机通电，先做记录故障曲线，再与原始记录的标准曲线对照，找出异同点，并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管，再开机实验，结果记录出来的图线并没有什么变化，由此证明光电倍增管没有老化变质。

②进一步检查信号处理板，未发现信号处理板各元器件损坏，对影响灵敏度有关的电位器检测，结果测得数据正常，这说明信号处理板没有故障。

7、测试过程中提示能量太低。

原因：

①光源灯泡使用时间超过寿命期。

②样池中有不透光的东西挡住了光。

处理方法：

①更换光源灯。

②拿走挡光的物品。

8、吸光值结果出现负值（最常见）。

原因：没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液。

处理方法：做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液。

9、当仪器波长固定在某个波长下时，吸光值信号上下摆动，特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。

原因：开关触点因长期氧化所致造成接触不良。

处理方法：用金属活化剂清洗按键触点即可。

10、样品信号重现性不良

原因：排除仪器本身的原因外，最大的可能是样品溶液不均匀所致，在简易的单光束仪器中，样品池架一般为推拉式的，有时重复推拉不在同一个位置上。

处理方法：

①采取正确的试样配置手段。

②修理推拉式样品架的定位碰珠。