一、采样设备和材料
采样工具
采样工具应使用不锈钢或其他强度适当的材料,表面光滑,无缝隙,边角圆润。采样工具应清洗和灭菌,使用前保持干燥。采样工具包括搅拌器具、采样勺、匙、切割丝、刀具(小刀或抹刀)、采样钻等。
样品容器
样品容器的材料(如玻璃、不锈钢、塑料等)和结构应能充分保证样品的原有状态。容器和盖子应清洁、无菌、干燥。样品容器应有足够的体积,使样品可在测试前充分混匀。样品容器包括采样袋、采样管、采样瓶等。
其他用品
包括温度计、铝箔、封口膜、记号笔、采样登记表等。
二、采样方案
样品应当具有代表性。采样过程采用无菌操作,采样方法和采样数量应根据具体产品的特点和产品标准要求执行。样品在保存和运输的过程中,应采取必要的措施防止样品中原有微生物的数量变化,保持样品的原有状态。
(n:同一批次产品应采集的样品件数,按具体产品要求执行,乳及乳制品一般是5个。)
1
生乳的采样
样品应充分搅拌混匀,混匀后应立即取样,用无菌采样工具分别从相同批次(此处特指单体的贮奶罐或贮奶车)中采集n个样品,采样量应满足微生物指标检验的要求。
具有分隔区域的贮奶装置,应根据每个分隔区域内贮奶量的不同,按比例从中采集一定量经混合均匀的代表性样品,将上述奶样混合均匀采样。
2
液态乳制品的采样
适用于巴氏杀菌乳、发酵乳、灭菌乳、调制乳等。
取相同批次最小零售原包装,每批至少取n件。
3
半固态乳制品的采样
3.1 炼乳的采样
适用于淡炼乳、加糖炼乳、调制炼乳等。
原包装小于或等于500 g(mL)的制品:取相同批次的最小零售原包装,每批至少取n件。采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
原包装大于500 g(mL)的制品(再加工产品,进出口):采样前应摇动或使用搅拌器搅拌,使其达到均匀后采样。
如果样品无法进行均匀混合,就从样品容器中的各个部位取代表性样。采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
3.2 奶油及其制品的采样
适用于稀奶油、奶油、无水奶油等。
原包装小于或等于1000 g(mL)的制品:取相同批次的最小零售原包装,采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
原包装大于1000 g(mL)的制品:采样前应摇动或使用搅拌器搅拌,使其达到均匀后采样。
对于固态制品,用无菌抹刀除去表层产品,厚度不少于5 mm。将洁净、干燥的采样钻沿包装容器切口方向往下,匀速穿入底部。
当采样钻到达容器底部时,将采样钻旋转180°,抽出采样钻并将采集的样品转入样品容器。采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
4
固态乳制品采样
4.1 干酪与再制干酪的采样
原包装小于或等于500 g的制品:取相同批次的最小零售原包装,采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
原包装大于500 g的制品:根据干酪的形状和类型,可分别使用下列方法:
(1)在距边缘不小于10 cm处,把取样器向干酪中心斜插到一个平表面,进行一次或几次。
(2)把取样器垂直插入一个面,并穿过干酪中心到对面。
(3)从两个平面之间,将取样器水平插入干酪的竖直面,插向干酪中心。
(4)若干酪是装在桶、箱或其它大容器中,或是将干酪制成压紧的大块时,将取样器从容器顶斜穿到底进行采样。采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
4.2 乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉的采样
适用于乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉等。
原包装小于或等于500 g的制品:取相同批次的最小零售原包装,采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
原包装大于500 g的制品:将洁净、干燥的采样钻沿包装容器切口方向往下,匀速穿入底部。当采样钻到达容器底部时,将采样钻旋转180°,抽出采样钻并将采集的样品转入样品容器。采样量不小于5倍或以上检验单位的样品。
五、检样的处理
5.1
乳及液态乳制品的处理
将检样摇匀,以无菌操作开启包装。
塑料或纸盒(袋)装,用75 %酒精棉球消毒盒盖或袋口,用灭菌剪刀切开;
玻璃瓶装,以无菌操作去掉瓶口的纸罩或瓶盖,瓶口经火焰消毒。
用灭菌吸管吸取25 mL(液态乳中添加固体颗粒状物的,应均质后取样)检样,放入装有225 mL灭菌生理盐水的锥形瓶内,振摇均匀。
5.2
半固态乳制品的处理
5.2.1 炼乳
清洁瓶或罐的表面,再用点燃的酒精棉球消毒瓶或罐口周围,然后用灭菌的开罐器打开瓶或罐,以无菌手续称取25 g检样,放入预热至45 ℃的装有225 mL灭菌生理盐水(或其他增菌液)的锥形瓶中,振摇均匀。
5.2.2 稀奶油、奶油、无水奶油等
无菌操作打开包装,称取25 g检样,放入预热至45℃的装有225 mL灭菌生理盐水(或其他增菌液)的锥形瓶中,振摇均匀。从检样融化到接种完毕的时间不应超过30 min。
5.3
固态乳制品的处理
5.3.1 干酪及其制品
以无菌操作打开外包装,对有涂层的样品削去部分表面封蜡,对无涂层的样品直接经无菌程序用灭菌刀切开干酪,用灭菌刀(勺)从表层和深层分别取出有代表性的适量样品,磨碎混匀。
称取25 g检样,放入预热到45℃的装有225 mL灭菌生理盐水(或其他稀释液)的锥形瓶中,振摇均匀。充分混合使样品均匀散开(1 min~3 min),分散过程时温度不超过40℃。尽可能避免泡沫产生。
5.3.2 乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉
取样前将样品充分混匀。
罐装乳粉的开罐取样法同炼乳处理,袋装奶粉应用75%酒精的棉球涂擦消毒袋口,以无菌手续开封取样。
称取检样25 g,加入预热到45℃盛有225 mL灭菌生理盐水等稀释液或增菌液的锥形瓶内(可使用玻璃珠助溶),振摇使充分溶解和混匀。
对于经酸化工艺生产的乳清粉,应使用pH 8.4±0.2的磷酸氢二钾缓冲液稀释。
对于含较高淀粉的特殊配方乳粉,可使用α-淀粉酶降低溶液粘度,或将稀释液加倍以降低溶液粘度。
5.3.3 酪蛋白和酪蛋白酸盐
以无菌操作,称取25 g检样,按照产品不同,分别加入225 mL灭菌生理盐水等稀释液或增菌液。
在对粘稠的样品溶液进行梯度稀释时,应在无菌条件下反复多次吹打吸管,尽量将粘附在吸管内壁的样品转移到溶液中。
5.3.3.1 酸法工艺生产的酪蛋白:使用磷酸氢二钾缓冲液并加入消泡剂,在pH 8.4±0.2的条件下溶解样品。
5.3.3.2 凝乳酶法工艺生产的酪蛋白:使用磷酸氢二钾缓冲液并加入消泡剂,在pH 7.5±0.2的条件下溶解样品,室温静置15 min。必要时在灭菌的匀浆袋中均质2 min,再静置5 min后检测。
5.3.3.3 酪蛋白酸盐:使用磷酸氢二钾缓冲液在pH 7.5±0.2的条件下溶解样品。
六、检验设备与用品
按GB 4789.1执行
检验设备:
称量设备:天平等。
消毒灭菌设备:干烤/干燥设备,高压灭菌、过滤除菌、紫外线等装置。
培养基制备设备:pH计等。
样品处理设备:均质器(剪切式或拍打式均质器)、离心机等。
稀释设备:移液器等。
培养设备:恒温培养箱、恒温水浴等装置。
镜检计数设备:显微镜、放大镜、游标卡尺等。
冷藏冷冻设备:冰箱、冷冻柜等。
生物安全设备:生物安全柜。
其他设备。
检验用品
常规检验用品:接种环(针)、酒精灯、镊子、剪刀、药匙、消毒棉球、硅胶(棉)塞、吸管、吸球、试管、平皿、锥形瓶、微孔板、广口瓶、量筒、玻棒及L形玻棒、pH试纸、记号笔、均质袋等。
七、检验方法
菌落总数:按GB 4789.2检验。
大肠菌群:按GB 4789.3中的直接计数法计数。
沙门氏菌:按GB 4789.4检验。
金黄色葡萄球菌:按GB 4789.10检验。
霉菌和酵母:按GB 4789.15计数。
单核细胞增生李斯特氏菌:按GB 4789.30检验。
双歧杆菌:按GB/T 4789.34检验。
乳酸菌:按GB 4789.35检验。
阪崎肠杆菌:按GB 4789.40检验。