内毒素生物学活性多种多样,在体内作用错综复杂,参与了机体许多病理生理反应过程.内毒素可以诱发机体炎症因子的过度释放,导致系统性炎症反应综合症、多器官衰竭,死亡率很高,占死因的50-70%.
推荐1曾经试过从大肠杆菌中提取粗制内毒素,用的方法是反复加热、冻存法,但是效果不是理想.具体方法是将大肠杆菌在2个大气压下(因具体条件限制,我只是在1.2个气压左右),蒸汽灭菌30min,后-20度冻存24小时,反复3次,即可.
推荐2,目前,市面上有卖从转染后的质粒DNA溶液中提取内毒素的试剂盒(因为,转染后质粒DNA溶液若含有内毒素,可能导致转染的失败),其也可以从细菌死亡裂解后的溶液中提取内毒素.
推荐3,传统的内毒素提取方法就是加热菌液或用其它方法使细菌裂解,然后用特殊石棉滤板过滤即可.
推荐,纯化重组蛋白的时候经常需要去除内毒素,当然同样的操作也可以提取内毒素.
推荐4,如果做正规的内毒素实验可以购买LPS O111:4或O55:5.