1 | 大肠菌群计数 | GB 4789.3 |
2 | 沙门氏菌检验 | GB 4789.4 |
3 | 致泻大肠埃希氏菌检验 | GB 4789.6 |
4 | 商业无菌检验 | GB 4789.26 |
5 | 培养基和试剂的雷竞技百科 要求 | GB 4789.28 |
6 | 单核细胞增生李斯特氏菌检验 | GB 4789.30 |
7 | 乳酸菌检验 | GB 4789.35 |
8 | 克罗诺杆菌检验 | GB 4789.42 |
1.修订标准中培养基和试剂像菌落总数一样增加了大肠菌群计数测试片,并且规定了性能要求:应以发酵乳糖产酸产气为阳性结果判断为依据,也就是测试片上必须是有气泡。同时其性能要符合GB4789.28中相关培养基的雷竞技百科 要求。
修订标准中要求对于乳及乳制品,无论是VRBA平板计数还是测试片计数,培养温度均为30 ℃ ±1 ℃,而BGLB复发酵的培养温度依然为36 ℃ ±1 ℃。
原因分析:
由于国内外文献报道,试验发现对于自然污染大肠菌群的生乳,无论是使用VRBA平板计数还是测试片计数,培养温度为30℃时乳制品中大肠菌群平板计数的结果,显著高于培养温度为36℃的计数结果。
2.对LST肉汤管乳糖发酵产气的观察修改为:小倒管或产气收集装置内有气泡产生,或轻轻振摇LST肉汤管可见试管内有细密气泡不断上升者判断为产气。
3.修订标准中平板菌落验证试验的选择:
从同一稀释度的VRBA平板上挑取典型和可疑菌落各5个,少于10个者,则挑取其全部菌落。
典型和可疑菌落的描述:
典型菌落为红色至紫红色,菌落周围带有或不带胆盐沉淀环,菌落直径一般大于0.5mm。可疑菌落为红色至紫红色,菌落直径一般小于0.5 mm.
内容来自分享报告《GB4789.3-2016大肠菌群计数标准修订进展》
1.修改样品前处理、增菌等:
修订标准中样品前处理:乳粉样品从快速混匀,改用室温浸泡1小时后再进行预增菌。
原因分析:
乳粉是经过高温喷雾干燥的产品,其中的沙门氏菌一般处于受损状态。乳粉中沙门氏菌检验的前处理,如果进行快速混匀,适应了乳粉干燥环境的受损沙门氏菌可能会出现渗透压休克。采用浸泡法室温静置一段时间后再进行预增菌,可以促进受损沙门氏菌的复苏。
2.培养基修改:增加RVS代替SC作为选择性增菌液,培养温度为42℃。并且TTB培养基培养时间增加了一个36℃。
内容来自征求意见稿《GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》
致泻大肠埃希氏菌检验标准修订要点:
1.ETEC的stp基因引物序列位点存在一定的突变,考虑优化修改。
2.根据风险监测数据,astA作为EAEC的鉴定基因在食品检测中假阳性率较高,考虑删除此基因。
3.增加实时荧光PCR方法
4.配套GB 29921-2021
2013:O157:H7不得检出(4789.36)
牛肉制品、生食果蔬制品
2021:DEC不得检出(4789.6)
牛肉制品、即食生肉制品、发酵肉制品类;
去皮或预切水果、去皮或预切的蔬菜及上述类别混合食品;
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》
承担单位:中国食品发酵工业研究院、龙岩出入境检验检疫局
主要修订内容:
增加生产过程抽样
增加快速检验方法
删除染色镜检要求
内容来自分享报告《商业无菌检验方法应用现状》
主要修订内容:
1.新增了参比培养基的质控要求:
2.新增分子生物学检验试剂的质控评定方法
3.新增国内菌种保藏中心菌株
CMCC:中国医学细菌保藏管理中心
CICC:中国工业微生物菌种保藏管理中心
4.整合了附录D和E,标准实施后,培养基生产厂商质检和使用者验收都需要采用现行附录D的验收形式。
5.新增28套培养基评价方法。
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》、征求意见稿等。
主要修订内容:
1.增加了OA李斯特氏菌显色培养基配方。
2.增加了Fraser增菌肉汤(FB1、FB2)培养基和试剂;
原因分析:
由于国际、国外标准规范,ISO标准采用了Fraser增菌肉汤(FB1、FB2),分离平板包含OA李斯特氏菌显色平板,征求意见稿参照ISO的方法,对其培养基进行调整,与国际接轨;增菌培养基由原来的“李氏增菌肉汤 LB(LB1,LB2)”改为“Fraser 增菌肉汤(FB1、FB2)”,分离培养基增加“OA李斯特氏菌显色平板”。
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》
4项食品用菌种检测方法获得2023国家标准立项
包括检验项目有:双歧杆菌(修订)、乳球菌(制定)、片球菌(制定)、魏茨曼氏菌(制定);
标准主题构架:包含菌种计数和鉴定两部分
计数:纯菌种+食品样品、平板计数法
鉴定(选做):
表型鉴定
生化鉴定
增加分子生物学方法:(PCR/荧光PCR)
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》
GB 4789.35《乳酸菌检验》修订情况
主要修订内容:
1、增加了乳酸菌鉴定用实时荧光PCR方法
2、修改了乳酸菌的定义等。
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》
GB 4789.42《克罗诺杆菌检验》修订情况
主要修改内容:
1.修改标准名称
《克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》修改为《克罗诺杆菌检验》
2.修改适用范围
克罗诺杆菌:增加婴幼儿辅助食品
3.针对克罗诺杆菌属不产黄色素造成漏检风险,删除在TSA琼脂培养,建立克罗诺杆菌属快速鉴定方法-PCR法。
4.为避免克罗诺杆菌属生长受抑制,参考ISO22964-2017,修改选择性增菌温度为41.5℃±0.5℃。
内容来自分享报告《食品安全微生物检验方法标准制修订进展》
从以上标准制修订的方向,可以看出,标准修订越来越严谨性、越来越适用,更多的站在标准使用者角度修改相关内容,完善了许多模糊的表述,增加了参考案例。测试片、PCR等快速检验及鉴定的方法逐渐走入国标中,从而使我国标准日益与国际标准接轨。
相信未来会有更多更成熟的方法引入到我国的标准体系中,我们现在可以去做一些技术储备,争取一些硬件条件,为未来的标准使用争取一些资源。