（一）什么是无菌技术

指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。

（二）无菌环境

无菌室

无菌柜

超净工作台

1、无菌室

（1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间

（2）无菌室的消毒和防污染

每日（使用前）紫外线照射（1~2小时）.

每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时）.

每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。

2、超净工作台

超净台的使用与保养:

（1）风速保持在0.32-0.48米/秒;

（2）使用前开启紫外灯照射30分钟以上;

（3）让超净台预工作10~15分钟;

（4）使用完毕后，用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净.

（三）无菌器材

灭菌器材：玻璃器皿、培养基、无菌衣等.

消毒器材：无菌室内的凳子、试管架、天平、工作台、手等

（四）无菌操作

1、目的：

（1）是保证待检物品不被环境中微生物的污染；

（2）是防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员。

2、进入无菌室前的准备

（1）定期检查无菌环境的空气是否符合规定；

（2）用紫外线灭菌处理30~60分钟；

（3）检查无菌器材是否完备；

（4）洗手消毒；

（5）手部消毒后，再穿戴无菌工作服。

3、检验操作过程的无菌操作要求

（1）在操作中不应有大幅度或快速的动作；

（2）使用玻璃器皿应轻取轻放。

（3）在正火焰上方操作；

（4）接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌；

（5）在接种培养物时，协作应轻、准。

（6）不能用嘴直接吸吹吸管。

（7）带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒。

斜面接种时的无菌操作

(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好塞子