1、金黄色葡萄菌检测第二法，从典型菌落中任选5个，是从一个平行样中选5个还是5个平行样加起来选5个？

答：从符合计数范围的稀释度三个平行样中任选五个做血浆凝固酶试验。

2、国标GB4789.10-2016金黄色葡萄球菌检验中培养时间很多都改成了24-48h ，这个跨度有点大，具体怎么判定啊？

答：如果培养24h后已经长菌就不需要再进行培养了；如果培养24h后未长菌则需要继续培养至48h。

3、Baird-Parker培养基上，金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌都是黑色菌落，有浑浊带和最外透明带，有的说普通变形杆菌的浑浊带比较大，可是培养基上很难判断，那有没有更好的判断方式？

答：金葡：直径约为0.5～1μm。平板上菌落呈金黄色，也有时为白色，大而突起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈，而Baird－Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈；在BP上区分不出来，需要进一步生化实验。

4、金黄色葡萄球菌定性检验分离中，要求分别用BP平板跟血平板。可是到5.5确认鉴定里面，在血浆凝固酶试验中，只需选其中一个就可以。
那么为什么不在分离这个步骤里就只使用BP平板呢。

答：一个看形态，一个看溶血，只有按照标准方法检验的结果才有法律效力。

5、金黄色葡萄球菌第二法涂布法中，1ml接种到三块平板是用一条玻璃涂布棒涂布就好还是同个样品不同平板也要更换涂布棒涂布？

答：个人见解，一根就可以了，最后统计数量的时候，是计算三个板的总数。

6、Baird-Parker琼脂配制中说要冷却至50°C的意思是高压灭菌完放入50°C的恒温水浴锅吗？

答：高压灭菌出锅后就制作BP平板，可以将热培养基基础进行冷却，加入增菌剂时保证基础培养基的温度不超过50摄氏度，不然可能影响增菌剂的效果。

7、每个稀释度分别吸取1mL样品匀液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量分别加入三块BP平板，以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量的作用是？如果同时在1ml的移液管中分别放入到三个平板中，当剩下的0.4nl样品液，存在的偏差是否对结果有影响？平板上是否应该做好相对应的标识？

答：每板分摊的液量，便于涂布干燥 ; 三板共计1mL，用来计量。使用总则规定的经检校的吸量管，吸1mL分到三块板上即可，先能够按标准完成测定，量器误差对不确定度的影响留待探讨。不管测定啥项目，平板都要作清楚标记。

8、无菌涂布棒是使用高压湿热灭菌还是可以按照接种环这样进行使用？

答:涂布捧，提前干热、湿热灭菌，现场灼烧灭菌，均可。购买使用已经灭菌的、一次性的涂布棒，也行。

9、如涂布过程中，触及平板边缘，出现的情况是菌落蔓延生长吗？

答：触及边缘，顺边缘扩散生长，无法像在平面上生长那样便于观察计数。

10、BP平板的倾倒量是否有规定，还是以15-20mL的量为好？且BP平板是当天检验，当天灭菌使用，不需进行剔除试验是吗？

答：就是通常平板浇注的用量。B.P.平板的制作、贮存，详见标准和培养基说明书。作好相关质控。

11、如样液未完全吸收，就翻转平板，是容易掉落下来，还是会影响金黄色葡萄球菌的生长？

答：有液体存在，长出的菌落可能洇漫交叠不清晰，观察计数困难。

12、分别做血浆凝固酶试验，如可疑还是需要挑取到营养琼脂小斜面进行鉴定是吗？

答：血凝酶试验，按标准5.5.2步骤进行。试验开始时，就要同时接种到BHI和NA斜面。先用BHI培养物鉴定，再用NA斜面培养后再次转接到BHI的培养物重复鉴定。

13、同时划线接种到血平板，是接种到一个平板便可？

答：一板划成几个区，接种几个菌落，能充分生长便于观察就可以的。

14、计算公式中的A（某一稀释度典型菌落的总数）是指8.4.2中的读数吧？而B（某一稀释度鉴定为阳性的菌落数）是指血平板的菌落数吗？

答：

A：是8.4.2数出来的典型总数。
B：是8.4.3挑取几个菌落作鉴定试验里，被确认阳性的菌落数。如果挑5个，则B可能数值为0、1、2、3、4、5。
C：是8.4.3挑取作鉴定试验的菌落数。如果挑5个，则C为5。
B÷C，鉴定试验的阳性比率。