在我们日常的检测工作和进行的某些实验中，经常会遇到需要预估细菌悬液的细菌浓度这样的问题，又是后我们需要精确计数菌液浓度，会用到血球计数板来进行计数；但有时我们只需要一个比较粗略的估计值即可，这里我推荐大家使用 麦氏比浊法 。

麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的，有表可查，这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同，且都有定值。麦氏比浊管的配比如下：

这是传统的麦氏比浊管的配制方法，目前也有市售的商品化产品，不需要自己配制，并且还有由乳胶粒子悬浮液制成的麦氏比浊管，与传统的麦氏比浊管相比，保存时间更长也更稳定。但麦氏比浊管具体应该怎?使用呢？

操作方法：

1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径（大小）的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水（NaCl），直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

4、直接用眼睛看（需要经验，误差较大）。

5、找张白纸，打上平行直线，然后观察读数（如图示，利用光在不同浓度液体折射不同）。

注意事项：

1、如果测定的肉汤培养物不澄清，由培养物的值减去δ接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的δ接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

2、如果肉汤颜色很深，把δ接种试管放在标准管的后面读数即可。

3、测定好的细菌，最好做一下梯度稀释涂布计数。

4、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度，如果是其他细菌，会有一定的差别，但通常差别都在一个数量级之内，适合于普通实验。

5、此种方法测定的准确性不是很高，如果是对细菌数量要求较精确的，请用紫外分光光度计。

6、麦氏比浊液应放室温暗处保存，用前混匀，有效期为6个月。应用时为了准确也可以使用比浊仪但一定要防止麦氏浊度标准管δ摇匀或已过期失效。

在微生物学检验中，麦氏比浊法常作为细菌鉴定、实验配制菌液时大致判断菌液浓度的一种方法，通常认为，如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时，相当于1.0×10⁸细菌数/mL，由于方法本身就是一种估计的方法，所以尽管不同细菌大小差异很大，但除了真菌孢子，细菌的差别不大，结果不会有影响。

另附孢子菌悬液制作方法：

菌种活化

将保藏菌接种在PDA斜面培养基试管中，培养7d～14d，使生成大量孢子。δ制备孢子悬液时，不得拔去棉塞。?打开1支只供制备1次悬液，?次制备孢子悬液必须使用新培养的ù菌孢子。

孢子悬液制备

在上述PDA斜面培养基中加入少量无菌蒸馏水，用无菌接种环轻轻刮取表面的新鲜ù菌孢子，将孢子悬液置于250mL锥形瓶内，然后注入40mL洗脱液。

锥形瓶中加入直径5mm的玻璃珠10粒～15粒与孢子混合，具塞后置水浴振荡器中不断振荡使成团的孢子散开，然后用单层棉纱布过滤以除去菌丝。将其装入灭菌离心管中，用离心机分离沉淀孢子，去上清液。再加入40mL洗脱液，重复离心操作3次。制成浓度为(0.8～1.2)×10⁶spores/mL的ù菌孢子悬液。若需要精确计数，则可以用改良察氏液体培养基稀释孢子悬液，用血球计数板计数。孢子悬液应在当天使用，若不在当天使用应在3℃～7℃保存，并尽量在4d内使用。