1、如何对付特殊液体?
特殊液体是相对于水来说的,密度,黏度,表面张力等和水都有很大的差异。因此对于特殊液体的移取就需要辅助的移液技术。
①反向移液和正向移液不同,吸液时按钮压到二档,排液时只压到一档,对于移取粘稠或者挥发性很强的液体时,可有效补偿因为挂壁或者滴漏引起的误差。
②预润洗预润洗或者预润湿的目的就是在吸头内壁形成一层液体薄膜,可有效防止液体挂壁残留,此方法可以和反向移液结合使用。
③密度调节功能移液器出厂前显示窗口读数为“0”,适用于与水性质类似的液体移液;密度调节功能只适用于已测试的溶液,也就是说一旦密度调节功能启动,这把移液器就只能移取这种或者性质类似的液体;对于一种特定的液体,不同量程的移液器调节的位置也不同,即使同一把移液器,在不同量程使用时,调节的位置都是不同的。
当然具体在实验室使用时还有很多小窍门,比如移取甘油时可以将吸头嘴部减掉一段,移液效果就会好很多;移取易挥发的液体,容易滴漏,可以在移取之前将吸头在酒精灯上稍微灼烧,嘴部变小防止滴漏。对于气体活塞式原理的移液器具有一些天然的劣势,可以用外置活塞式取液器做补充。
2. 清洁在移液器使用过程中,难免会发生污染。(1)外壳污染,用清洗剂或者醇类擦拭,最后用纯净水擦拭晾干即可;(2)对于因操作失误引起的倒吸,液体进入移液器内,首先垂直拆卸,同样清洗后晾干即可,处理要及时,防止液体进入活塞或者弹簧。
3. 消毒因为实验要求的无菌操作,必须要求移液器灭菌处理,简单的办法是用75%的酒精擦拭就可以达到目的,并且可以在实验前放于紫外灯下照射消毒。对于更严格的操作,可能要移液器高温高压灭菌(有些移液器可以整支高温高压灭菌),湿热灭菌后一定要晾干,还要注意观察活塞上的硅脂是否均匀。
4. 去核酸污染对于外源核酸敏感的实验,常常要对移液器做去除DNA处理, 方法如下:
清洗液:10×储存液的配置:30.6g NaCL39.2g Glycine523mL H2O
加1N HCl至1000mL
处理方法:
10×储存液稀释成1倍缓冲液,将移液器下半段拆卸下来的各部分,在95℃下浸泡30min ;用蒸馏水将各部分冲洗干净;在60℃下烘干处理或者完全晾干; 移液器完全冷却后组装。可见,移液器的化学耐受性也是需要考虑的关键因素。另外,组装移液器时大家会有体会,有些移液器零件过多,组装时容易出现遗漏和错装;有些移液器拆卸时需要特殊的工具,清洁维护的条件较为受限;而有些移液器既不需要额外的工具也无需组装过多的零件,维护保养起来非常方便。
5. 如何判断移液器是否处于正常使用状态?在实验过程中,我们判断移液器的状态都是出了问题后发现的,比如出现漏气,倒吸,或者吸不动,打不净;亦或是发现移取1ml液体时明显不够才发现移液器有问题,所以平时除了对移液器保养之外,自己动手做校正也很重要。
方法就是称重检测,需要万分之一天平、十万分之一甚至百万分之一天平及防蒸发装置,参照ISO8655的要求进行。