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来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶,可以特异地切割双链 DNA(在 DNA PAM 存在的情况下,也可以切割单链 DNA 或单链 RNA)。Cas9 切割位点位于目标序列(target sequence)内,离 PAM(NGG)区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。因为反应需要添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA),整个体系,包括 Cas9 酶都必需不含任何核酸酶活性。其中,Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和非配对的链。本产品中,Cas9 的 H840 被突变为 A,使 Cas9 的 HNH 结构域失活。因此,Cas9 (H840A)只有 RuvC 结构域有切割活性,是能够形成单链缺刻的 Nickase。
产品组成
Cas9(H840A) 100 pmol (1 pmol/μL)
10 × Buffer 3 1 mL
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