SUMO Protease
产品概述
SUMO Protease(SUMO 蛋白酶,又称ULP蛋白酶)能够识别并且高效地将 SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)从融合蛋白上切割下来。相对于 EK 和 TEV 等蛋白酶的短小识别位点,SUMO 蛋白酶能够识别完整的 SUMO 序列,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His 标签,便于融合蛋白切割后用Ni-NTA(产品货号:PAN001)去除。SUMO Protease是自E.coli 表达经亲和纯化的重组蛋白酶。
酶活性单位定义
在 30℃条件下反应 1 小时,能够切割 5 ?g 的反应底物达 90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
溶液成分
SUMO Protease储存液 | 10X Cleavage Buffer |
---|---|
25 mM Tris-HCl,pH 8.0 | 500 mM Tris-HCl,pH 8.0 |
150 mM NaCl | 10 mM DTT |
50 ?M DTT | |
20%(V / V)Glycerin |
推荐反应体系
反应物组成 | 体积 |
---|---|
SUMO 融合蛋白 | 100 ?g |
SUMO Protease | 2 ?l(10 U/?l) |
10X SUMO Protease Buffer | 10 ?l |
ddH2O | 至100 ?l |
不同温度下的参考反应时间:
蛋白酶纯度 > 95%, as determined by SDS-PAGE
- 4℃反应 15~16 小时
- 16℃反应 4 小时
- 25℃反应 1.5 小时
- 30℃反应 1 小时
活性测试
待测融合蛋白100?g,加入sumo protease 2?l,4℃反应16小时,取酶切前后样品SDS-PAGE检测,如右图所示 >90% 融合蛋白被切割。
储存条件
长期储存于 -80℃,可保存2年;或小量分装后保存于 -20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10X SUMO Buffer置于 -20℃保存。
包装规格
货号 | 规格 |
---|---|
RPP003-500 | 500 U |
RPP003-2000 | 2000 U |
RPP003-10000 | 10000 U |