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一、从组织中提取总RNA
1)液氮研磨，组织块直接放入研体中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/mltrizol加入trizol，转移入离心管进行第2步操作。
2)匀浆：组织样品按50-100mg/mltrizol加入trizol，另外，组织体积不能超过trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。
二、从细胞中提取总RNA
1)培养贴壁细胞：不须消化，可直接用trizol进行消化、裂解，trizol体积按10cm2/ml比例加入。
2)悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。
2．细胞或组织加trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。
3．12000rpm离心5min，弃沉淀。
4．按200?l氯仿/ml trizol加入氯仿，振荡混匀15分钟，室温放置15min。注：禁用漩涡振荡器，以免基因组DNA断裂。
5．4℃ 12000g离心15min。
6．吸取上层水相，至另一离心管中。
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