1) 使用ODP色谱柱并设定流动相pH值为10。
2) 柱后连接加热线圈。
3) 只需要一个泵。由于流动相是碱性的,柱后不需要与反应液混合。
4) 由于吲哚美辛在加热线圈中碱性水解变成荧光性物质,能够进行选择性好的高灵敏度分析。
(样品的前处理)
1) 加20 μLCH3CN至20 μL的血清中
2) 搅拌(2~ 3秒)
3) 离心分离(10,000 G , 2分钟)
4) 取上层清液,进样。
Sample : Indomethacin in Serum
Column : Shodex Asahipak ODP-50 6E (6.0 mm I.D. x 150 mm) Eluent : 25 mM Sodium phosphate buffer (pH10.0)/CH3CN=65/35 Flow rate : 1.0 mL/min Detector : Fluorescence (Ex. 298nm , Em. 375nm) Column temp. : Room temp. Post column : Heating coil at 140 ℃ is followed with cooling coil reaction at 15 ℃
H. Kubo, Y.Umiguchi, T.Kinoshita, Chromatographia Vol.33, No.7/8, 1992