别称:
pET22b
启动子:T7
复制子:pBR322
终止子:T7 terminator
质粒分类:大肠系列质粒;大肠表达质粒;pET系列质粒
质粒大小:5493bp
质粒标签:N-pelB,C-6×His
原核抗性:Amp
克隆菌株:DH5a
培养条件:37度
表达宿主:大肠杆菌BL21(DE3)
培养条件:37℃,有氧,LB
诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:T7(TAATACGACTCACTATAGGG)
3'测序引物:T7-ter(TGCTAGTTATTGCTCAGCGG)
质粒属性
载体宿主:大肠杆菌
载体用途:蛋白表达,分泌表达
基因种属:空载体
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:
质粒简介
pET-22b质粒是一种原核表达载体,N端含有一个pelB前导肽、C-端的His标签。该质粒含有多个常用的酶切位点,便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导,目的基因被克隆到质粒载体上,受噬菌体强转录及翻译信号控制。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能强大的系统,也是现今原核表达方面使用广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下,可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。