(产品编号:IAC315)
联系人:薛丽丽
电话:15010301983
使用对象
IAC-SEP?维生素B12亲和柱能够特异性的纯化样品中的维生素B12,它采用了柱状琼脂糖凝胶作为固相载体,琼脂糖凝胶与维生素B12抗体偶联形成免疫吸附剂,装柱制成免疫亲和柱。它能够特异性的纯化样品中的维生素B12。维生素B12亲和柱广泛地应用于饮料、牛奶和奶粉,饮料等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对提高食品的雷竞技百科 和安全性起到十分重要的作用。
维生素B12家族中有四大成员:氰钴胺、架胺、腺苷钴胺和羟钴胺.自然界中,微生物生物合成的维生素B12终形式为架胺、腺苷钴胺和羟钴胺;但是由于它们性质不太稳定,所以在工业提纯过程中人为地加入,使天然形式的维生素B12转化为性质更为稳定的氰钴胺。我们俗称的维生素B12,是指氰钴胺,我们食品中添加的维生素B12为氰钴胺,因此我们检测食品中的维生素B12只需检测氰钴胺。
该说明书方法应用亲和柱方法检测食品中维生素B12(氰钴胺)的检测方法。如需检测氰钴胺、架胺、腺苷钴胺和羟钴胺总量的方法,请参考以下两种方法进行样品的前处理,然后再应用本亲和柱进行净化:
AOAC2014.02:Improved_AOAC-FirstAction 2011.08 for the Analysis of Vitamin B12 in Infant Formula and Adult Pediatric Formulas First Action 2014.02(2)
原理
维生素B12免疫亲和柱能够特异性的纯化样品中的维生素B12,将样品与提取液混合、提取、过滤,然后将滤液通过免疫亲和柱。此时,维生素B12物质键合在亲和柱中的抗体上。用蒸馏水将免疫亲合柱上的杂质除去。用甲醇通过分离柱,将维生素B12从抗体上分离下来。,将过滤的甲醇溶液注入HPLC或LC-MS进行测定。
储存条件
该亲和柱保存在2-8°C条件下,不能冷冻,保质期为18个月。建议在室温(18-30°C)下使用。
实验溶液制备
磷酸盐溶液:50mmol/L KH2PO4(用磷酸调节pH至3.5),过滤膜。
pH7.4 PBS溶液:8.0克NaCl + 2.90克Na2HPO4 12H2O + 0.24克KH2PO4 + 0.2克KCl加990mL纯水溶解,加纯水至1升。
50mM乙酸钠缓冲液(pH 4.0):4.1g乙酸钠加990mL纯水溶解,用乙酸调节pH为4.0,加纯水至1升。
液相色谱条件
色谱柱:Cloversil-C18,4.6×250mm(5um)
流动相:磷酸盐溶液:乙腈=85:15(v/v)
流速:1.0 mL/min
检测器:紫外检测器,361nm
进样体积:20-100uL
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。将上述样品5-50mL(根据柱容量和灵敏度选取合适体积)提取液注入玻璃注射器中,将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约2mL/min(1-2滴/秒)流速缓慢通过免疫亲和柱,直至液面下降到亲和柱管体(未完全流干)。以2-3mL/min(1-2滴/秒)流速用10.0mL水淋洗,弃去全部流出液,并使2mL~3mL空气通过柱体。准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min(1滴/秒),收集全部洗脱液于玻璃试管中,50°C下氮气浓缩吹干后,用流动相定容至0.5 mL,供HPLC或LC-MS分析。
注意事项
1)不要随便更改操作说明书中的操作步骤,如需更改要和本公司技术部联系,确认更改是否合理。
2)操作步骤中,样品过柱,淋洗,洗脱时,一定要控制好流速,不能太快,否则会使检测结果偏低。
3)如果将标准品直接过柱验证回收率时,一定要确保标准上柱液中甲醇浓度不要超过10%,否则会影响柱子的吸附能力。
4)试验中使用的玻璃仪器等,一定要清洗干净,尤其是用次氯酸等处理过的仪器。
需要准备的设备及试剂(中检维康提供)
C/N编号
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物品
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ZJ0612
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Clover多位泵流操作架(配有1台空气泵,6个10mL针筒)
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IAC315
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维生素B12免疫亲和柱(25支/盒)
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※
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维生素B12标准品
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31955C
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微纤维滤纸(1.5um,100张/盒)
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31240C
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折叠式槽纹滤纸(100张/盒),或中速定性滤纸
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36010C
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一次性塑料烧杯(25/包)
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34000C
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一次性测试管(250支/包)
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36020C
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塑料漏斗(10个/包)
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35016
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色谱纯级的甲醇(4升/瓶)
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C546250-U
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CloversilC18反相色谱柱4.6*150mm(5um)
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C546250-U
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CloversilC18反相色谱柱4.6*250mm(5um)
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序号 | 产品编号 | 商品中文名称 | 规格 |
真菌毒素免疫亲和柱 | |||
1 | IAC101 | 黄曲霉毒素B1亲和柱,1ml | 25支/盒 |
IAC101-3 | 黄曲霉毒素B1亲和柱,3ml | 25支/盒 | |
2 | IAC102 | 黄曲霉毒素M1亲和柱,3ml | 25支/盒 |
3 | IAC103 | 黄曲霉毒素总量亲和柱,1ml | 25支/盒 |
IAC103-3 | 黄曲霉毒素总量亲和柱,3ml | 25支/盒 | |
4 | IAC104 | 6合1黄曲霉毒素亲和柱,3ml | 25支/盒 |
5 | IAC105 | 玉米赤霉烯酮亲和柱,1ml | 25支/盒 |
IAC105-3 | 玉米赤霉烯酮亲和柱,3ml | 25支/盒 | |
6 | IAC106 | 杂色曲霉素亲和柱,1ml | 25支/盒 |
7 | IAC107 | 伏马菌素亲和柱,3ml | 25支/盒 |
8 | IAC108 | T2毒素亲和柱,3ml | 25支/盒 |
9 | IAC109 | 桔青霉素亲和柱,3ml | 25支/盒 |
IAC110 | 25支/盒 | ||
10 | IAC111 | 呕吐毒素亲和柱,1ml | 25支/盒 |
IAC111-3 | 呕吐毒素亲和柱,3ml | 25支/盒 | |
11 | IAC112 | 赭曲霉毒素A亲和柱,1ml | 25支/盒 |
IAC112-3 | 赭曲霉毒素A亲和柱,3ml | 25支/盒 | |
真菌毒素复合亲和柱 | |||
1 | IAC201 | AZ黄曲霉毒素-玉米赤霉烯酮2合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
2 | IAC202 | AO黄曲霉毒素-赭曲霉毒素A2合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
3 | IAC203 | AOZ黄曲霉毒素-赭曲霉毒素A-玉米赤霉烯酮3合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
4 | IAC204 | ADOZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-赭曲霉毒素A-玉米赤霉烯酮4合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
5 | IAC205 | DZ呕吐毒素玉米赤霉烯酮2合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
6 | IAC206 | ADOTZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-赭曲霉毒素A-T2毒素-玉米赤霉烯酮5合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
7 | IAC207 | ADZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-玉米赤霉烯酮3合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
8 | IAC208 | ADOFTZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-赭曲霉毒素A-伏马毒素-T2毒素-玉米赤霉烯酮6合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
9 | IAC209 | DTZ 呕吐毒素-T2毒素-玉米赤霉烯酮3合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
10 | IAC210 | DONs 3in1 呕吐毒素 3合1 (DON,3-DON,15-DON) | 25支/盒 |
11 | IAC211 | DONs 4in1 呕吐毒素 4合1 (DON,3-DON,15-DON,NIV) | 25支/盒 |
12 | IAC212 | AD黄曲霉毒素-呕吐毒素2合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
13 | IAC213 | ADOFZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-赭曲霉毒素A-伏马毒素-玉米赤霉烯酮5合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
14 | IAC214 | ADOFTZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-赭曲霉毒素A-伏马毒素-T2毒素-玉米赤霉烯酮-杂色曲霉毒素7合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
15 | IAC215 | FZ伏马毒素-玉米赤霉烯酮2合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
15 | IAC216 | ADFZ黄曲霉毒素-呕吐毒素-伏马毒素玉米赤霉烯酮4合1亲和柱,3ml | 10支/盒 |
兽药残留免疫亲和柱 | |||
1 | IAC301 | 4合1瘦肉精亲和柱(克伦特罗、沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺) | 25支/盒 |
IAC 303 | 3合1瘦肉精亲和柱(克伦特罗、沙丁胺醇、特布他林) | 25支/盒 | |
2 | IAC302 | 莱克多巴胺亲和柱 | 25支/盒 |
3 | IAC305 | 16合1磺胺亲和柱 | 10支/盒 |
IAC30 | 9合1磺胺亲和柱 | 10支/盒 | |
IAC305B | 10合1磺胺亲和柱 | 10支/盒 | |
IAC305C | 7合1磺胺亲和柱 | 10支/盒 | |
IAC305D | 2合1磺胺亲和柱 | 25支/盒 | |
4 | IAC 306 | 4合1硝基呋喃类代谢物 | 10支/盒 |
IAC 306A | 呋喃妥因代谢物(AHD) | 25支/盒 | |
IAC 306B | 呋喃它酮代谢物(AMOZ) | 25支/盒 | |
IAC 306C | 呋喃唑酮代谢物(AOZ) | 25支/盒 | |
IAC 306D | 呋喃西林代谢物(SEM) | 25支/盒 | |
5 | IAC 308 | 苯巴比妥亲和柱 | 25支/盒 |
6 | IAC 309 | 氯霉素亲和柱 | 25支/盒 |
7 | IAC 310 | 恩诺沙星亲和柱 | 25支/盒 |
8 | IAC 311 | 6合1玉米赤霉醇亲和柱 | 25支/盒 |
IAC311C | 7合1玉米赤霉醇氯霉素亲和柱 | 25支/盒 | |
9 | IAC 312 | 4合1孔雀石绿和结晶紫类亲和柱 | 25支/盒 |
IAC 312A | 2合1孔雀石绿和结晶紫 | 25支/盒 | |
IAC 312B | 2合1隐性孔雀石绿和隐性结晶紫 | 25支/盒 | |
10 | IAC 313 | 苏丹红亲和柱 | 25支/盒 |
11 | IAC 314 | 喹乙醇亲和柱 | 25支/盒 |
12 | IAC 315 | 维生素B12亲和柱 | 25支/盒 |
13 | IAC 316 | 双酚A亲和柱 | 25支/盒 |
14 | IAC 317 | 环丙沙星亲和柱 | 25支/盒 |
15 | IAC 318 | 卡那霉素亲和柱 | 25支/盒 |
16 | IAC 319 | 庆大霉素亲和柱 | 25支/盒 |
17 | IAC 320 | 链霉素亲和柱 | 25支/盒 |
18 | IAC 321 | 安普霉素亲和柱 | 25支/盒 |
19 | IAC 322 | 叶酸亲和柱 | 25支/盒 |
20 | IAC 318 | 睾酮亲和柱 | 25支/盒 |
21 | IAC 319 | 三聚氰胺亲和柱 | 25支/盒 |
22 | IAC 320 | 赤藓红亲和柱 | 25支/盒 |
23 | IAC 321 | 苋菜红亲和柱 | 25支/盒 |
24 | IAC 322 | 利巴韦林亲和柱 | 25支/盒 |
25 | IAC 323 | 肝素亲和柱(普通型) | 10支/盒 |
26 | IAC 323S | 肝素亲和柱(型) | 10支/盒 |
27 | IAC 324 | 河豚毒素亲和柱 | 25支/盒 |
28 | IAC 325 | 孕酮免疫亲和柱 | 25支/盒 |
29 | IAC 326 | 雌二醇免疫亲和柱 | 25支/盒 |
30 | IAC 327 | 己烯雌酚/己烷雌酚/双烯雌酚免疫亲和柱 | 25支/盒 |
31 | IAC 328 | 生物素免疫亲和柱 | 25支/盒 |
32 | IAC 329 | 牛免疫球蛋白免疫亲和柱 | 25支/盒 |
33 | IAC 330 | 维生素B7/维生素B9/维生素B12三合一免疫亲和柱 | 25支/盒 |