用途
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的叶酸,从而对样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC进行分析。 亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
概述
叶酸(FA)是一种重要的B族维生素,是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得供给的微量物质,叶酸缺乏会引起巨幼红细胞、高同型半胱氨酸血症,后者被认为是的独立危险因素。
原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过离心、脱脂后,缓慢的通过叶酸免疫亲和柱,在免疫亲和柱内叶酸与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用洗脱液洗脱叶酸,然后注入到分析仪器中用于检测。
注意事项
1.使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25°C)。
2.亲和柱2~8°C储存,不得冻存 。
3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4.取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
5.柱容量:500ng。根据样品中大致含量,适当调整上样量,乘以相应稀释倍数,避免上样量超过柱容量。
6.pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
7.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的叶酸,从而对样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC进行分析。 亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
概述
叶酸(FA)是一种重要的B族维生素,是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得供给的微量物质,叶酸缺乏会引起巨幼红细胞、高同型半胱氨酸血症,后者被认为是的独立危险因素。
原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过离心、脱脂后,缓慢的通过叶酸免疫亲和柱,在免疫亲和柱内叶酸与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用洗脱液洗脱叶酸,然后注入到分析仪器中用于检测。
注意事项
1.使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25°C)。
2.亲和柱2~8°C储存,不得冻存 。
3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4.取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
5.柱容量:500ng。根据样品中大致含量,适当调整上样量,乘以相应稀释倍数,避免上样量超过柱容量。
6.pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
7.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。