微量法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
产品内容:
标准液:液体4mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂1瓶,-20℃避光保存,临用前加4mL试剂三溶解。
试剂三:液体40mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:
FDA水解反应能很好的反应土壤中微生物活性和土壤雷竞技百科 的变化以及生态系统中质的转化,是土壤雷竞技百科 研究中的重要生物学指标之一。
FDA是一种无色化合物,在介质中能被许多土壤酶所催化水解,并经脱水反应,产生酶解终产物荧光素,稳定不易被分解,并在490nm处有强吸收峰,通过检测490nm处的吸光值变化可计算得FDA水解酶活性。
需自备的仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤:
一、样本处理
称取风干过20目筛土壤约0.05g,备用。
二、测定操作表
空白管
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标准管
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对照管
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测定管
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样本(g)
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0.05
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0.05
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标准液(μL)
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40
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双蒸水(μL)
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40
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试剂一(μL)
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200
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200
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240
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200
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试剂二(μL)
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40
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充分混匀,30℃,震荡1h
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试剂三(mL)
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160
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160
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160
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160
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10000g,25℃,离心5min,取200μL上清于微量石英比色皿/96孔板中测定490nm处吸光值A,△A1=A标准管-A空白管,△A2=A测定管-A对照管
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注意:空白管和标准管只需测定一次。