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中国科学院西北高原所揭示牦牛远缘杂交后代雄性不育的主要原因

放大字体  缩小字体 时间:2023-04-21 09:02 来源:中国科学院 原文:
核心提示:犏牛是牦牛(Bos grunniens)和普通牛(Bos taurus)的杂交后代,兼具高寒极端环境适应能力以及较好的产肉、奶等优良经济性状。雌性犏牛具有正常的生育能力,但雄性犏牛因生精阻滞而不完全育,是探究哺乳动物生殖隔离分子机制和物种形成的天然模型。中国科学院西北高原生物研究所动物繁育与功能基因组学团队在牦牛生精细胞发育分析和牦牛基因组结构变异解析等前期工作的基础上,利用细胞培养、减数分裂分析和蛋白组检测等试验,围绕精原细胞发育和精母细胞减数分裂关键调控因子筛选和鉴定,获得了阶段性的重要进展。
  犏牛是牦牛(Bos grunniens)和普通牛(Bos taurus)的杂交后代,兼具高寒极端环境适应能力以及较好的产肉、奶等优良经济性状。雌性犏牛具有正常的生育能力,但雄性犏牛因生精阻滞而不完全育,是探究哺乳动物生殖隔离分子机制和物种形成的天然模型。中国科学院西北高原生物研究所动物繁育与功能基因组学团队在牦牛生精细胞发育分析和牦牛基因组结构变异解析等前期工作的基础上,利用细胞培养、减数分裂分析和蛋白检测等试验,围绕精原细胞发育和精母细胞减数分裂关键调控因子筛选和鉴定,获得了阶段性的重要进展。
 
  精原细胞来源于在胎儿期形成的性原细胞。后者在出生后的睾丸内恢复有丝分裂,并从生精索中央向基底膜迁移形成精原细胞。该研究通过检测3月龄牦牛和犏牛睾丸组织内支持细胞的转录特征发现:犏牛支持细胞的DNA甲基化修饰与牦牛存在显著差异;402个基因在犏牛支持细胞中差异表达,包括胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和维甲酸(RA)合成的基因。GNDF是哺乳动物精原细胞维持的关键因子,而RA参与调控性原细胞发育和精原细胞分化。体外细胞培养试验发现,外源性GDNF显著促进了精原细胞的增殖。同时,研究显示,犏牛性原细胞和未分化精原细胞数量以及其中处于增殖状态的细胞数量均显著高于同龄牦牛,表明犏牛精原细胞的形成和命运决定受到了影响,这是导致生殖细胞数量减少的主要原因。
 
  犏牛精子发生的另一缺陷是精母细胞减数分裂阻断导致的凋亡。为描绘参与精母细胞减数分裂过程的分子图谱,并寻找参与犏牛减数分裂的蛋白,科研团队通过流式细胞术筛选纯化了牦牛和犏牛精母细胞,并进行了蛋白组分析。结果发现,452个蛋白在犏牛精母细胞中出现丰度差异,291个蛋白仅在牦牛精母细胞中表达。在犏牛中表达下调的蛋白,如LMNA、HSPA4L、PTBP2、TDRD1、YBX3、STRBP、VRK1、CLGN、GPAT2和ELAVL1等,与DNA损伤刺激反应和DNA双链断裂修复相关;而牦牛独特表达的蛋白,如MAGED1、TDRD5、SETX、ADAD1、YBX2、GTSF1、SYCE2和CDK1等,则参与细胞分裂和周期以及外源性凋亡信号通路调节。结合蛋白组和犏牛及其回交后代睾丸组织单细胞转录组数据,研究筛选到一个在犏牛精母细胞中表达下调但在回交后代中的表达水平趋近于亲本的基因——结构特异性核酸内切酶亚基SLX4。进一步分析发现,该基因在犏牛粗线期精母细胞中的表达显著减少。这表明SLX4的表达失调,或导致犏牛同源重组阶段crossover的形成失败和减数分裂的紊乱。
 
  上述工作通过描绘牦牛生殖细胞和睾丸体细胞内外源因子的表达图谱为解析牛属动物正常精子发生提供了重要数据,通过对比分析发现犏牛精原细胞形成异常和减数分裂缺陷是导致其不育的两个原因。本研究发现的参与DNA双链断裂、联会和同源重组等减数分裂关键事件的蛋白质,为犏牛雄性不育机制解析和遗传矫正策略研究奠定了基础。
 
  近日,相关研究成果分别以Transcriptome analysis reveals dysregulated gene expression networks in Sertoli cells of cattle-yak hybrids、Comparative proteomic analysis identifies differentially expressed proteins associated with meiotic arrest in cattle-yak hybrids、Localization and expression of SLX4 in the testis of sterile male cattle-yak为题,发表在Theriogenology、Proteomics、Reproduction in Domestic Animals上。研究工作得到国家自然科学基金和青海省自然科学基金团队项目的支持。
日期:2023-04-21
 
 
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