近日,江苏省农业科学院质量安全所安全控制功能材料与智能化创新团队在SCI期刊Analytical Biochemistry上发表了Cry2Aa杀虫蛋白抗独特型抗体创制的最新研究进展。团队成员林曼曼为论文第一作者,刘贤金研究员、刘媛副研究员和Johnson Lin教授(University of KwaZulu-Natal)为论文共同通讯作者。
Bt Cry毒素广泛用于转基因抗虫作物构建及微生物源农药开发,然而,Cry毒素存在毒力有限、杀虫谱窄等系列问题,目前仍有许多害虫不能被Cry毒素有效控制,另外,长时间大范围的使用导致昆虫的抗性风险不断上升,因此挖掘新的抗虫基因资源尤为重要。本研究借助噬菌体展示技术和体外定向突变技术,以前期获得的抗独特型单链抗体为研究对象,分别扩增该抗体重、轻链基因,并采用SOE-PCR技术拼接获得完整的单链抗体(scFv),构建了随机突变库,经过多轮特异性富集筛选,成功获得一株与Cry2Aa兔多抗结合活性提高2.2倍的突变体,并对Cry2Aa与多抗的结合具有竞争抑制作用。该突变株与Cry2Aa杀虫蛋白靶标害虫小菜蛾(Plutella xylostella) BBMV受体蛋白具有显著结合能力,并与Cry2Aa在小菜蛾BBMV受体蛋白有共同的结合蛋白脂质运载蛋白(polycalin)。该材料为进一步深入探索挖掘Cry2Aa杀虫蛋白模拟物提供了研究基础。
该研究得到国家自然科学基金重点项目、国家自然科学基金面上项目和江苏省自主创新等项目资助。
文章链接:Anti-idiotypic single-chain variable fragment antibody partially mimic the functionally spatial structure of Cry2Aa toxin, Analytical Biochemistry, 625 (2021), https://doi.org/10.1016/j.ab.2021.114222。