2014??3日,台湾地区"卫生福利?quot;发布部授食字?031900266号公告,预告制定"食品?a href='//www.sqrdapp.com/news/tag_4566.html' class='zdbq' title='动物相关食品资讯' target='_blank'>动物用药残留量检验方?氯霉紟/a>籺a href='//www.sqrdapp.com/news/tag_1005.html' class='zdbq' title='抗生素相关食品资? target='_blank'>抗生紟/a>之检?quot;草案?0日内接收公众意见或建议、/p>
2. 检验方法:检体经萃取及净化后,以液相层析串联质谱仪(liquid chromatograph/tandem mass spectrometer, LC/MS/MS)分析之方法、/p>
2.1.1.1. 离子源:电洒离子化(electrospray ionization, ESI)、/p>
2.1.1.2. 层析管:XSELECT HSS PFP,2.5 m,内径 2.1 mm 10 cm ,或同级品、/p>
2.1.2. 离心机(Centrifuge):可达3200 g以上者、/p>
2.1.3. 振荡器(Shaker)、/p>
2.1.4. 均质机(Homogenizer)、/p>
2.1.5. 氮气蒸发装置(Nitrogen evaporator)、/p>
2.1.6. 固相真空萃取装置(Solid phase extraction vacuum manifolds)、/p>
2.1.7. 旋涡混合器(Vortex mixer)、/p>
2.2. 试药:甲酸与甲醇均采用液相层析级;正己烷、乙酸乙酯、氨水(30%)、三氯醋酸(trichloroacetic acid)及醋酸均采用试药特级;去离子水(比电阻 25 可达 18 M/cm以上);氯霉素、甲磺氯霉素、氟甲磺氯霉素及氟甲磺氯霉素胺对照用标准品;chloramphenicol-d5、thiamphenicol-d3、florfenicol-d3及florfenicol amine-d3同位素内部标准品、/p>
2.3. 器具及材料:
2.3.1. 容量瓶:1 mL?00 mL.
2.3.2. 离心管:50 mL,PP材质、/p>
2.3.3. 固相萃取匣(Solid phase extraction cartridge):Oasis MCX,6 mL,150 mg,或同级品、/p>
2.3.4. 滤膜:孔?.22 m,PVDF材质、/p>
2.4. 试剂调制
2.4.1. 50%甲醇溶液9/p>
取甲?0 mL,加去离子水使?00 mL.
2.4.2. 5%醋酸溶液9/p>
取醋? mL,加去离子水使?00 mL.
2.4.3. 5%三氯醋酸溶液9/p>
称取三氯醋酸50 g,以去离子水溶解使?000 mL.
2.4.4. ?.6%氨水之乙酸乙酯溶液:
取氨?0 mL,加乙酸乙酯使?000 mL.
2.4.5. ?%氨水之甲醇溶液:
取氨?0 mL,加甲醇使?00 mL.
2.4.6. 25%甲醇溶液9/p>
取甲?5 mL,加去离子水使?00 mL.
2.5. 移动相溶液之调制9/p>
2.5.1. 移动相溶液A:
取甲? mL,加去离子水使?000 mL,以滤膜过滤,取滤液供作移动相溶液A.
2.5.2. 移动相溶液B:甲醇、/p>
2.6. 标准溶液之配制:
取氯霉素、甲磺氯霉素、氟甲磺氯霉素及氟甲磺氯霉素胺对照用标准品各?0 mg,?确称定,分别?0%甲醇溶液溶解并定容至100 mL,作为标准原液,于 -20 贮存。临用时分别取适量各标准原液混合,?0%甲醇溶液稀释至0.003~2.5 mg/mL,供作标准溶液、/p>
2.7. 内部标准溶液之配制:
取chloramphenicol-d5、thiamphenicol-d3、florfenicol-d3及florfenicol amine-d3同位素内部标准品各约10 mg,?确称定,共置?00 mL容量瓶中,以50%甲醇溶液溶解并定容,供作内部标准溶液,于 -20 贮存、/p>
2.8. 检液之调制9/p>
2.8.1. 萃取9/p>
2.8.1.1. 肌肉9/p>
将检体细切均质后,取? g,精确称定,置于离心管中,加入内部标准溶液50 mL及含0.6%氨水之乙酸乙酯溶?0 mL,旋涡混合1分钟,振?0分钟,以3200g离心10分钟,取上清液。加?%醋酸溶液2 mL,旋涡混合1分钟,取下层液,?5℃水浴中以氮气浓缩至? mL,加入5%醋酸溶液4 mL,旋涡混合后,供净化用、/p>
2.8.1.2. 蛋与内脏9/p>
将检体混匀后,取约5 g,精确称定,置于离心管中,加入内部标准溶液50 mL?%三氯醋酸溶液20 mL,旋涡混合1分钟,振?0分钟,以3200g离心10分钟,取上清液,加入正己?0 mL,旋涡混合1分钟,以3200g离心5分钟,取下层液供净化用、/p>
2.8.1.3. 乳汁9/p>
将检体混匀后,精确量取5 mL,置于离心管中,加入内部标准溶?0 mL?%三氯醋酸溶液20 mL,旋涡混合1分钟,振?0分钟,以3200g离心10分钟,取上清液供净化用、/p>
2.8.1.4. 蜂蜜9/p>
将检体混匀后,取约5 g,精确称定,置于离心管中,加入内部标准溶液50 mL?%醋酸溶液10 mL,旋涡混合1分钟,振?0分钟,供净化用、/p>
2.8.2. 净化:
?.8.1.节供净化用溶液,注入预先以甲醇5 mL及去离子 5 m L润洗之固相萃取匣,弃流出液,?%醋酸溶液5 mL流洗,弃流出液,再以?%氨水之甲醇溶? mL冲提,收集冲提液,于45℃水浴中以氮气浓缩至干,再以25%甲醇溶液定容? mL,经滤膜过滤后,供作检液、/p>
2.9. 基质匹配检量线之制作:
取空白检体,不添加内部标准溶液,?.8.节萃取、净化及以氮气浓缩至干后,分别添加不同浓度标准溶?.5 mL及内部标准溶?0 mL,再以去离子水定容? mL,经滤膜过滤后,依下列条件进行液相层析串联质谱分析。就各氯霉素类抗生素与内部标准品之波峰面积比,与对应之各氯霉素类抗生素浓度,制作基质匹配检量线、/p>
液相层析串联质谱测定条件(注):
层析管:XSELECT HSS PFP,2.5 m,内径2.1 mm 10 cm.
移动相溶液:A液与B液以下列条件进行梯度分析
更多检测方法请见:http://www.xmtbt-sps.gov.cn/detail.asp?id=45928