沃特世猪肉中“瘦肉精”残留检测解决方案

    近日“瘦肉精”事件的发生使人们再次将注意力集中到动物体内的β-受体激动剂的检测。 我们平常说的“瘦肉精”是一类动物用药，有数种药物被称为瘦肉精，例如莱克多巴胺（Ractopamine）及克伦特罗（Clenbuterol）等。沃特世作为色谱分析行业的领导者，再一次展现了公司集成样品前处理SPE产品、色谱产品、质谱产品于一体的技术优势，在第一时间推出了包含前处理在内的解决方案。
 

    使用沃特世混合型强阳离子交换OASIS^® MCX SPE固相萃取柱结合ACQUITY UPLC^®/Xevo^® TQ超高效液相色谱串联四级杆质谱联用仪，可以在5分钟内轻松、快速、准确的检测到极低含量的“瘦肉精”类物质。例如在猪肉基质中的克伦特罗（Clenbuterol）可以达到低于0.005ppb（5ppt）的检测限。并且在0.05ppb基质浓度下6针重复进样RSD为2.65%。对于猪尿液当中的克伦特罗（Clenbuterol）甚至可以达到0.001ppb（1ppt）的检测限。沃特世UPLC/Xevo TQ 免费附带的Quanpedia方法库已经自带了超过28种常见β-受体激动剂的MRM条件，您无需再对这些化合物进行质谱参数的调谐即可轻松获取分析方法。
 

图一：沃特世UPLC/Xevo TQ超高效液相色谱串联四级杆质谱联用仪


 

图二：基质当中0.05ppb克伦特罗（Clenbuterol）的检出信噪比S/N(PtP)>60


 

图三：克仑特罗系由尿样获得，按照(A)20pg/mL，(B)10pg/mL和(C)1pg/mL加样。

    猪肉及猪肝脏中的β-受体激动剂（克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布它林、塞曼特罗、塞布特罗、溴代克仑特罗、溴布特罗、苯氧丙酚胺）的前处理方法如下：

    1. 取2 g 粉碎样品，加入8 mL 0.2 M 的pH为5.2的乙酸钠缓冲液，充分混匀后，加入50 μL β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶混匀，于37 ˚C水浴水解过夜。

    2. 将水解液振荡15 min，在5000 rpm条件下离心分离10 min后，取4 mL上清液，添加100 μL10ng/mL的内标溶液(克伦特罗-D9,沙丁胺醇-D3)混匀,加入5 L0.1M高氯酸混合均匀 并 调节溶液pH 值到1 ± 0.3。以5000 rpm条件下离心分离10 min后，移取上清液并用 10 M 的氢氧化钠溶液调节pH值到11。

    3. 加入10 mL 饱和氯化钠溶液和10 mL 异丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液，离心分离后取有 机相，在40˚C 水浴下用氮气将其吹干。

    4. 提取残渣中加入5 mL 0.2 M乙酸钠缓冲液(pH 5.2)，超声混匀溶解残渣。

    5．进行下一步固相萃取净化。（参考下图）

    解决方案涉及产品信息：
 

    SPE固相萃取柱：Oasis MCX 3cc/60mg （产品部件号186000254）

    UPLC色谱柱：ACQUITY UPLC HSS T3，1.8um 2.1mm*50mm（产品部件号186003538）

    HPLC色谱柱：Atlantis T3，5um 2.1mm*150mm（产品部件号186003736）