本帖最后由 苏微微生物 于 2019-3-7 15:05 编辑
黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus)寄生曲霉 (a.parasiticus)产生的次生代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。 它们存在于土壤、动植物、各种坚果中,特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品,是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。 黄曲霉毒素被世界卫生组织划定为1类致癌物,毒性比砒霜大68倍,仅次于肉毒霉素,是目前已知霉菌中毒性最强的。据悉,黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物 肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡,在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见,其毒性和致癌性也最强。"B1是最危险的致癌物,经常在玉米,花生,棉花种子,一些干果中常能检测到,其中以花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素,尤其是高温高湿地区的粮油及制品中检出率更高。 常用的黄曲霉毒素检测方法有液相法、试剂盒法、快速检测卡法等,所对应的检测耗材分别是免疫亲和柱、酶联免疫试剂盒以及时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。 一、液相法 本方法测定的基础是抗原抗体反应,抗AFT的单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的AFT经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,毒素分别与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。最后采用甲醇洗脱,然后进行相关分析。
所需材料:(1)设备及器皿耗材:天平、粉碎机、离心机、涡旋混匀仪或摇床(转速≥200r/min)、;量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器(100μL~1000μL)、快速定性滤纸、玻璃微纤维滤纸(whatman934-AH,直径11cm,孔径1.5μm)、20mL玻璃注射器等。 (2)试剂:甲醇(色谱级)、乙腈(色谱级)、氯化钠、蒸馏水或去离子水。 (3)检测耗材:苏微牌免疫亲和柱
苏微牌免疫亲和柱通过FAPAS、CNCA能力认证认可;通过粮食局、中粮,中储粮、食药监、出入境检验检疫、疾控中心、质监局、国家轻工质监、第三方检测等机构权威对比验证。
免疫亲和柱采用新技术,抗体载量大,柱容量高于国标要求,柱回收高、雷竞技百科 稳定,获得江苏省轻工业科学技术进步奖。
二、试剂盒法
本方法采用提取液中的毒素(或毒素标准溶液)与酶标记物竞争结合微孔包被的毒素特异性抗体。经过洗涤去除游离的毒素和酶标记物。酶催化底物生成蓝色物质,颜色深浅与样品中或标准品中毒素含量成反比。终止液终止反应450nm波长下测量吸光度值,标准曲线定量。
测试盒组成
1、包被抗体的反应板
2、A试剂:样品稀释液
3、B试剂: AFB1标准溶液
苏微公司参与起草、制定了真菌毒素相关国家标准
《GB/T 19540-2004饲料中玉米赤霉烯酮的测定》;
《GB/T 19539-2004饲料中赭曲霉毒素A的測定》;
《GB/T 174S0-200S饲料中黄曲霍毒素B1的测定酶联免疫吸附法》;
《GB 1307S.2-2006饲料卫生标准饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量》;
《GB 13078-2017饲料卫生标准》等国家标准。
试剂盒产品自1995年产业化以来,雷竞技百科 稳定,深受客户好评。
三、快速检测卡法
本方法应用竞争抑制免疫层析的原理,样本中若含有AFB1,则在侧向移动的过程中会与荧光微球标记的特异性单克隆抗体反应,抑制抗体和NC膜检测线上AFB1-BSA偶联物的结合。随着样本中AFB1含量的升高,结合于检测线上的抗体量减少,相应的检测线荧光强度也随之变弱。使用专用时间分辨荧光免疫层析检测仪读数,可定量的测出样本中AFB1的含量。
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【黄曲霉毒素B1荧光定量卡性能】 包装规格:25条/盒
产品编号:SWYG101 灵敏度:0.1ng/ml 相关标准: NY/T 2548-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辨荧光免疫层析法 本方法是快速定量法,从样品提取到打印结果仅需20分钟,快捷高效准确。
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