猪蓝耳病毒抗体检测卡,采用免疫胶体金层析技术制成,可快速检测猪血清中的猪蓝耳病毒抗体。
【原理】
本试剂采用免疫胶体金层析技术制成,可快速检测猪血清中的猪蓝耳病毒抗体。将猪蓝耳病毒抗原包被在硝酸纤维素膜的检测线(T)上,抗猪蓝耳病毒抗体包被在硝酸纤维素膜的质控线(C)上,用胶体金标记的猪蓝耳病毒抗原干燥后置于玻璃纤维素膜下端。当血清加入加样孔内,由于层析的原理,血清开始沿纸条移动,当遇上干燥的金标抗原,将其溶解,并带着金标抗原继续往上移动,至硝酸纤维素膜的检测线。如果样品中有猪蓝耳病毒抗体存在时,包被在检测线上的猪蓝耳病毒抗原和金标猪蓝耳病毒抗原与样品中的猪蓝耳病毒抗体将会在检测线上形成一个夹心的免疫复合物,呈一条紫红色线,判定为阳性。样品中的抗体效价越高,色线颜色越深。如果样品中没有猪蓝耳病毒抗体,检测线(T)上没有色带出现,判定为阴性。样品和金标抗原继续往上移至质控线时,此处的抗猪蓝耳病毒抗体将会同金标猪蓝耳病毒抗原结合,在质控线(C)上形成一条紫红色线,证明本检测试剂有效。
【血清制备】
按常规方法抽取2-3ml血液置洁净干燥的试管中,静置0.5-1小时待血液凝固后于4000转/分钟离心10分钟(也可将血液静置1-2小时,待血液凝固自然析出血清),分离血清。要求血清清亮,无溶血、无污染。血清样品短期可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
【操作方法】
1.在检测卡的加样孔内加入2滴(约80ul)待检血清样品。
2. 将检测卡平放于桌面上,在室温下静置5-20分钟内判定结果,超过20分钟的结果只能作为参考。
【结果判断】
1. 阴性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。
2. 阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。抗体滴度越高,检测线(T)颜色越深。
3. 弱阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线,但检测线区(T)出现的颜色很浅。
4. 失效:在观察孔内,对照线区(C)和检测线区(T)都不出现色线;或仅检测线区(T)出现色线。
【诊断参考】
1.如果该猪未接种过猪蓝耳病毒疫苗:
a) 当被检样品检测线(T)处无明显色带出现,说明被检测样品中没有猪蓝耳病毒抗体。如果猪群健康,应当及时进行猪蓝耳病毒疫苗接种。
b) 当被检样品检测线(T)处有明显色带出现,则该猪有可能为野毒感染,应进一步观察验证。
2.如果该猪已接种过猪蓝耳病毒疫苗:
c) 当被检样品检测线(T)条带的色泽≥对照卡中1:40效价时,说明猪蓝耳病毒抗体的滴度较高,已达到抵御强度攻击的保护水平。
b) 当被检样品检测线(T)条带的色泽<对照卡中1:40效价时,说明猪蓝耳病毒抗体效价未达到抵御猪蓝耳病毒强度攻击的最低保护滴度,建议进行疫苗补种。
【注意事项】
1.检测前请仔细阅读说明书,本产品提供的各种试剂仅供本实验用;
2.检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后检测卡将失效;
3.待检血清样品应新鲜清亮,溶血或腐败的样品不可用于检测;
4.实验的废弃物应按污染物处理规定妥善处理。
【储存及有效期】 保存于干燥阴凉处(2-30℃),保质期24个月。
猪蓝耳病毒抗体检测卡产品说明书
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