改良Skirrow氏琼脂基础的原理及实验现象

一、用途：

用于空肠弯曲杆菌的分离培养（GB4789.9-2014，GB4789.28-2013，ISO标准）
二、实验原理：

蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质；氯化钠提供均衡的渗透压；无菌冻融脱纤维羊血提供额外的营养物质；铁、焦亚硫酸钠和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长；TMP、多粘菌素B和万古霉素可抑制样本中非弯曲菌的生长，从而便于分离空肠弯曲菌；琼脂是凝固剂。
三、培养基配方（g/L）：

蛋白胨	15.0
酵母浸粉	5.0
胰酪蛋白胨	2.5
氯化钠	5.0
琼脂	5.0
pH 7.4±0.2	25℃

FBP溶液：丙酮酸钠、焦亚硫酸钠、铁各0.25g溶解于100mL纯化水中，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。

抗生素溶液：称取头孢哌酮0.032g，两性霉素B0.01g，利福平0.01g，溶解于5mL 50%无菌乙醇溶液中。

配制方法：称取基础培养基4.25g，加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至50-55℃左右时，加入1ml过滤除菌的FBP浓原液、一支改良Skirrow氏琼脂基础添加剂（万古霉素mg，TMP0.5mg，多粘菌素B 250 IU）1mL和无菌冻融脱纤维羊血5ml，混匀，倾入无菌平皿。

四、试验方法：

1、制备质控菌液。

2、将质控菌液划线接种于平板。

3、42±1℃微需氧培养24-48小时，记录实验结果。
五、结果观察与解释

接种以下质控菌株，42±1℃微需氧培养24-48小时：

质控菌株	菌株编号	生长情况	其他特征
空肠弯曲菌	ATCC33291	+++	灰色扁平湿润有光泽，呈沿接种线向外扩散
大肠埃希氏菌	ATCC25922	-	/
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	-	/

图1-1 改良Skirrow氏琼脂基础质控结果

a:空肠弯曲菌，b:大肠埃希氏菌，c:金黄色葡萄球菌

六、注意事项

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。