一、用途及原理
该培养基用于乳酸菌的分离培养。
培养基中的蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素等成分,乙酸钠、吐温80可促进乳酸菌的生长,叠氮化钠对革兰氏阴性菌有一定的抑制作用,硫酸镁、硫酸锰、铁提供微量元素,氯化钠维持渗透压,琼脂为凝固剂,碳酸钙为指示剂,乳酸菌可在此培养基中生长,分解葡萄糖产大量乳酸,使培养基的pH下降,碳酸钙被溶解,菌落周围变透明。
二、培养基配方(g/L)
葡萄糖 |
10.0 |
酵母浸粉 |
10.0 |
蛋白胨 |
5.0 |
牛肉浸粉 |
2.0 |
吐温80 |
0.5 |
乙酸钠 |
2.0 |
叠氮化钠 |
0.01 |
硫酸镁 |
0.2 |
硫酸锰 |
0.01 |
铁 |
0.01 |
氯化钠 |
0.01 |
碳酸钙 |
5.0 |
琼脂 |
12.0 |
pH |
6.8±0.1 |
三、配制方法
称取本品46.74克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷区后倾入无菌平皿,备用。
注:培养基中的碳酸钙不溶于水,溶解后需充分摇匀,使碳酸钙分布均匀,制成的平板应为淡黄色不透明固体。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在30℃下培养3-7天:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
回收率 |
生长现象 |
鼠李糖乳杆菌 |
ATCC7469 |
20-200 |
≥70% |
白色圆形凸起菌落,周围有透明溶钙环 |
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
20-200 |
≥70% |
白色圆形凸起菌落,周围有透明溶钙环 |
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