如何判断一个培养基的稳定性及进行保存

在平常的实验中，我们经常会遇到一个情况：配制了200mL培养基，实际上只用了50mL培养基，那剩下的培养基是否能下次使用？或者应该保存在什么条件下可下次继续使用？主要从以下两个方面判断：

（1）污染的可能性。主要考虑使用过程和保存过程综合考量是否有较大的污染可能性，若存在污染风险，不建议继续留用。（注：培养基不可重复灭菌）

（2）培养基成分的稳定性。根据培养基的组分稳定性，也可大致判断培养基是否易于长时间或短时间储存。

注：严格来讲，培养基的储存条件及时间应由相应的效期试验得出，本文章的方法仅用于大致判断培养基的稳定性。

一、培养基中较稳定成分

（1）稳定的无机盐（不参与氧化还原反应）：如磷酸盐、氯化钠、氯化钾等，对光热不敏感，通常也不与其他成分发生氧化还原反应，在培养基的长期存放过程中不会发生变化。

（2）琼脂：琼脂在中性常温环境下较为稳定，在培养基中仅做为凝固剂，因此在适宜的保存条件下，琼脂通常也不会发生明显变化。

注：酸性条件和结冰会破坏琼脂结构，若培养基长期保存过程中未密封，则琼脂会逐渐失水变干。

二、相对稳定的成分

（1）蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等营养成分：这些营养成分提供微生物生长所需的碳氮源、维生素等，可耐短时间的高温灭菌，相对较为稳定。但内含的维生素在长时间的高温和见光条件下仍然会逐渐分解，短期内（不超过1个月）的室温保存通常不会有问题，若需要长期保存，应放置阴凉处或冷藏避光保存。

（2）糖醇苷类：在培养基中主要提供碳源，种类繁多，有一些相对稳定，但在高温灭菌后，会逐渐发生焦化现象，导致培养基pH下降。在培养基含糖量不高于5g/L的情况下，短时间内通常不会有明显变化，若培养基同时含有磷酸盐稳定培养基的pH，则更有利于培养基的长期存放。

三、不稳定成分

（1）抗生素类：有些抗生素不耐高温，配制时只能过滤除菌，对光和热敏感，但也有一些抗生素非常稳定，如氯霉素、萘啶酮酸等，在高温下不分解。含有抗生素类的培养基通常应保存在2-8℃。

（2）天然成分：如卵黄、血液、血清等不稳定成分，通常需现配现用，短期保存需放置在2-8℃，不建议长期保存。

（3）氧化还原性成分：如亚铁离子、半胱氨酸、巯基乙醇酸钠等，易被空气氧化，需密闭保存。

（4）染料/酸碱指示剂：带颜色的染料通常对光比较敏感，见光易褪色，应注意避光保存。

（5）不稳定的盐：如亚硒酸氢钠、亚硫酸钠、碳酸氢钠等，易分解或被氧化还原等，含此类成分的培养基应现配现用或冷藏保存。

总结：

若培养基中的成分相对比较稳定，可在室温短期存储或冷藏长期储存；

若培养基中含有不稳定成分，应现配现用或在2-8℃短期存储。

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