华农培养基成分与制法

培养基中的胰蛋白为高营养蛋白胨；蛋白胨对保持猪痢疾密螺旋体(Treponema hyodysenteriaeT.h)毒力有一定的作用；胰蛋白胨为酪蛋白胰酶消化物，富含氨基氮，有利于此菌生长；培养基中所加脱纤牛血既可支持生长，又可指示生长菌的溶血性能。所加抗菌素作为抑菌剂，可抑制大多数杂菌的生长而不影响该菌的生长。

【成分】

每升牛肉浸汁中的成分
胰蛋白(tryptose, Oxoid)	10g
胰蛋白胨(tryptone, Oxoid)	5g
蛋白胨(proteose peptone, Oxoid)	5g
503型蛋白胨(武汉肉联厂)	5g
氯化钠	5g
琼脂粉(日本进口分装)	15g
Spactam 粉剂	800mg
(溶于10ml灭菌蒸馏水内）
无菌脱纤牛血	50ml

【制法】

取牛肉浸汁(用鲜牛肉按常法制备，-20℃保存)置温水浴内融化，再悬浮上述各成分(除Spectam和脱纤牛血外)于1000ml牛肉浸汁内，加温溶解，调至pH至7.3±0.5,121℃灭菌15分钟，取出灭菌的上述培养基，置30~40℃的温水浴中不断摇动，使较快均匀降温至50℃左右，再加入 Spectam 溶液及无菌脱纤牛血，迅速混匀后，乘热倾注平皿制成琼脂平皿基，备用。

【用途】用以分离猪痢疾病密螺旋体和无害密螺旋体(Trepo nema innocens T.I)。

【注意事项】

1.本培养基用于分离T.I时，用Spactam作抑菌剂，其抑制杂菌效果优于多粘菌素B(Polymyxin B)，但分离T.I时，因Spactam对某些T.I株有抑制作用，故改用多粘菌素B ，使用时用灭菌蒸馏水将其配成20000u/ ml，待培养基灭菌后冷至50℃左右，按1％量加入培养基中，使终含量为200u/ml 。

2.本培养基中的胰蛋白胨可用Bacto tryptome(Difco)替代；蛋白胨可用大豆蛋白代替。

3.Spactam粉剂是含50%Spectinomycin(壮观霉素)，用量按0.8mg/ml计算。