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液相色谱仪如何对金银花的含量和特征进行测定?

放大字体缩小字体发布日期:2022-02-21 来源: 日立科学仪器(北京)有限公司浏览次数: 1061
核心提示:液相色谱仪如何对金银花的含量和特征进行测定?

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此次使用日立Primaide高效液相色谱仪和技尔InertSustainSwift C18色谱柱,参照2020药典对金银花的含量和特征图谱进行测定。

实验分析


0 1
实验仪器及耗材

液相色谱仪:日立Primaide

色谱柱:InertSustainSwift C18 5?m 250 × 4.6mm(P/N: 5020-88027)

GL Filter针式过滤器(GLS0604 25mm x 0.22μm Nylon)

GL Vial样品瓶(GLS0008 2mL透明瓶带刻度+ GLS0143红膜白胶垫片)


02

溶液配制

对照品溶液的制备:

取绿原酸对照品、3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸对照品和 4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加 75%甲醇制成每 1mL 含 0.28mg、0.15mg、44μg 的溶液,即得。

供试品溶液的制备:

取本品粉末(过四号筛)约 0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 75%甲醇 50 mL,称定重量,超声处理(功率 500W,频率 40kHz)30 分钟,放冷,再称定重量,用 75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法:

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 2μL,注入液相色谱仪,测定,即得。

【系统适用性要求】理论板数按绿原酸峰计算应不低于 10000。

03
色谱条件

色谱柱:InertSustainSwift C18 5?m 250 × 4.6mm(P/N: 5020-88027)

流动相A:乙腈

流动相B:0.1 %磷酸溶液

梯度洗脱:

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※完全按照药典方法进行分析

流速:0.7mL/min

柱温:25℃

检测波长:UV 327nm

进样量:2μL

实验结果与讨论

对照品图谱

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供试品图谱

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重现性

6.jpg

以绿原酸计

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以3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸计

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以4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸计

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说明:本实验按照药典方法进行检测,无改动。

特征图谱

色谱条件

色谱条件与系统适用性试验除检测波长为240nm外,其他同【含量测定】酚酸类。

溶液配制

参照物溶液的制备:

取绿原酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.40 mg的溶液,即得。

供试品溶液的制备:

同【含量测定】酚酸类。

供试品特征图谱中应呈现7个特征峰,与参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,应在规定值的±10%之内,保留时间规定值为:0.91(峰1)、1.00[峰2(S)]、1.17(峰3)、1.38(峰4)、2.43(峰5)、 2.81(峰6)、2.93(峰7)。

分析结果

特征图谱:

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7 个特征峰 峰2(S):绿原酸;峰3:当药苷;峰4:断氧化马钱子苷;峰5:(Z)-二聚断马钱苷烯醛;峰6:3,5-双咖啡酰奎宁酸;峰7:4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸

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说明:本实验完全按照药典标准规定进行,无改动。

结论

按照2020版中国药典要求,对金银花进行含量测定,各峰分离度良好,以绿原酸计,其理论塔板数超过 29000,且5次实验重复性良好。特征图谱测定结果显示,各物质的相对保留时间满足药典要求。实验表明,使用日立Primaide高效液相色谱仪和技尔InertSustainSwift C18色谱柱,参照2020药典对金银花进行含量和特征图谱测定,结果优异,完全满足药典要求。

END

公司介绍:

日立科学仪器(北京)有限公司是世界500强日立集团旗下日立高新技术有限公司在北京设立的全资子公司。本公司秉承日立集团的使命、价值观和愿景,始终追寻“简化客户的高科技工艺的企业理念,通过与客户的协同创新,积极为教育、科研、工业等领域的客户需求提供专业和的解决方案。

我们的主要产品包括:各类电子显微镜、原子力显微镜等表面科学仪器和前处理设备,以及各类色谱、光谱、电化学等分析仪器。为了更好地服务于中国广大的日立客户,公司目前在北京、上海、广州、西安、成都、武汉、沈阳等十几个主要城市设立有分公司、办事处或联络处等分支机构,直接为客户提供快速便捷的、专业的各类相关技术咨询、应用支持和售后技术服务,从而协助我们的客户实现其目标,共创美好未来。


关键词: 液相色谱仪

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