非洲猪瘟快速测试仪现场检测步骤及样品前处理

非洲猪瘟快速测试仪现场检测步骤及样品前处理：CSY-E96D非洲猪瘟快速测试仪可快速畜牧类疾病诊断如非洲猪瘟、禽流感、猪瘟、猪蓝耳、伪狂犬等疾病。

非洲猪瘟快速测试仪样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

3. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

4.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

5.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

非洲猪瘟快速测试仪操作步骤：

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；

3.待测样本孔加待测样本10μL，样本稀释液40μL；

4.随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴锅孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在非洲猪瘟快速测试仪450nm波长处测定各孔的OD值。

自从2018年8月以来，非洲猪瘟疫情在我国来势汹汹，尽管采取了严厉措施予以防控，但疫情仍在持续发酵中。

事实上，在整个产业链中，从生猪养殖到餐桌，要切实防控疫情，涉及到众多监管部门，离不开多方的群策群力，单靠一个农业农村部是无法解决全程问题的。

根据农业农村部的通报，尽管“我国发生非洲猪瘟疫情以来，所有已发疫情均已得到及时有效处置，目前疫情呈点状发生，总体可控”，但也承认“非洲猪瘟病毒在我国已形成了一定污染面，传统的生产、流通、消费方式短期内难以根本改变，疫情传播途径错综复杂，风险难以完全阻断，且目前尚无有效疫苗，以上因素共同决定了防控工作的复杂性和长期性”。

非洲猪瘟快速测试仪现场检测步骤及样品前处理准备工作：

1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

3.20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

非洲猪瘟快速测试仪实验所需自备试验器材：

1.检测仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱或水浴锅

4.蒸馏水或去离子水