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逗点生物新动态动物源性食品中四环素类兽药残留量检测

放大字体缩小字体发布日期:2018-05-23 来源:逗点生物 作者:逗点生物 浏览次数: 30
核心提示:逗点生物Copure固相萃取柱已广泛应用于基因检测、新药研发、临床诊断、食品安全、环境保护、工业品检测和生命科学等领域。在逗点生物的实验室将为您贡献更多的SPE应用。

动物源性食品中四环素类兽药残留量检测的固相萃取方法

(Copure?HLB)


一、实验目的
本法为以Copure? HLB(60mg/3mL)柱开发的针对动物源食品(猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品)中硝基呋喃类代谢物残留检测的样本前处理净化方法,HPLC法作为检测手段。Copure? HLB(60mg/3mL)柱净化效果良好,回收率满足测试要求,重现性好,与知名厂商同型号柱性能相当。


二、实验目标物
土霉素(CAS:79-57-2),四环素(CAS:60-54-8),金霉素(CAS:57-62-5),强力霉素(CAS:564-25-0)


三、应用范围
本方法适用于动物源性食品中四环素类药物多残留的HPLC检测及确证。


四、参考标准
《GB/T 21317-2007 食品安全国家标准 动物源性食品中四环素类兽药残留量 高效液相色谱法》。


五、实验材料
Biocomma?Copure? HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360);W品牌HLB固相萃取柱60mg/3mL。


六、实验方法
1、样品提取
称取混匀牛奶试样5 g(精确到0.01 g),置于50 mL离心管中,用0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine 缓冲液溶解并定容至50 mL,漩涡混合1 min,冰水浴超声10 min,转移至50 mL离心管中,冷却至0 ℃-4 ℃,5000 r/min离心10min(温度低于15 ℃),用快速滤纸过滤待净化。


2、SPE柱净化
(1)活化:HLB柱依次用5 mL甲醇和5 mL水活化。
(2)上样和洗脱:准确吸取10 mL备用液过HLB固相萃取柱,待样液全部流出后,依次用5 mL水和5 mL甲醇水(1:9,v/v)淋洗,弃去全部流出液。2.0kPa以下减压抽干5 min,用10 mL甲醇-乙酸乙酯(5:95, v/v)洗脱,收集洗脱液。
(3)重新溶解:洗脱液于40 ℃氮气吹干,加10 mmol/L三氟乙酸水溶液1.0 mL溶解残余物,滤膜过滤,供高效液相
色谱测定。


3、HPLC条件
设备:Waters Alliance 2690
检测器:Waters 2487 双波长检测器;检测波长:268nm
色谱柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流动相:A:乙腈
B:10 mmol/L三氟甲酸水溶液
洗脱方式:梯度洗脱

表1 洗脱梯度条件


流速:1 mL/min
柱温:室温
进样体积:20?L


七、实验结果
1、0.8mg/kg牛奶基质中四环素的添加回收结果
表2 0.8mg/kg牛奶基质中四环素的添加回收结果



表3 W品牌0.8mg/kg牛奶基质中四环素的添加回收结果



2、 添加水平为0.8mg/kg牛奶基质中四环素检测色谱图
图1 添加水平为0.8mg/kg牛奶基质中四环素检测色谱图

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