猪肉中兽药多残留检测的固相萃取方法Copure HLB

猪肉中兽药多残留检测的固相萃取方法

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（CopureHLB）

一、实验目的

本研究针对猪肉中多种兽药残留同时检测的目的，开发了经过优化的固相萃取前处理方法和HPLC分析方法。

待测物质为主要的抗生素兽药种类中具有代表性的化合物，包括磺胺类、四环素类、喹诺酮类、氯霉素类。

二、实验目标物

麻保沙星(CAS:115550-35-1)，双氟沙星（CAS:98106-17-3），土霉素（CAS:79-57-2），氟苯尼考

（CAS:73231-34-2），磺胺多辛（CAS:2447-57-6），磺胺间二甲氧嘧啶（CAS:155-91-9），氯霉素

（CAS:56-75-7）。

三、应用范围

本方法适用于猪肉中多种兽药残留的检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma?Copure?HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360)。

五、实验步骤

1、样品提取

准确称取猪肉3g于50mL离心管中，加入0.1mol/L的EDTA-Mcllvaine溶液15mL，漩涡摇匀1min，冰水浴

超声10min，控制样品温度<15℃；5000r/min离心8min。取上清液，重复提取一次，合并清液、快速滤纸过

滤，备用。

2、SPE柱净化

(1)活化：HLB固相萃取柱使用前用3mL甲醇、3mL水活化。

(2)上样和洗脱：在HLB固相萃取柱上加入10mL备用样液，弃去流出液，用3mL5%甲醇水溶液（v/v）淋

洗，弃去淋洗液，抽干小柱；用8mL甲醇-乙酸乙酯溶液（1:9，v/v）洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程

保持流速2mL/min）。

(3)重新溶解：洗脱液40℃氮吹吹干，1mL甲醇定容，过0.45μm滤膜，上机测试。

3、HPLC条件

设备：WatersAlliance 2695

色谱柱：WelchUltimate XB-C18(4.6×250mm, 5μm)

检测器：Waters2487紫外检测器

流动相：A：乙腈B：0.1%甲酸水溶液（v/v）

洗脱方式：梯度洗脱

表1梯度洗脱条件

流速：1.0mL/min

检测波长：270nm

进样体积:20μL

六、实验结果

1、4mg/kg猪肉中多种兽药的添加回收结果

表24mg/kg猪肉中多种兽药的添加回收结果

2、添加水平为4mg/kg猪肉中多种兽药检测的液相色谱图