高压蒸汽灭菌锅使用标准操作程序及注意事项

高压灭菌锅在日常使用和维护中有许多地方是需要重视的，这样才能更好的保证人员安全及设备的正常运行。

一、实验室操作标准程序

1 目的

建立高压灭菌锅操作以及维护保养的标准程序，规范操作人员的操作，从而确保人员的安全及设备的正常运行。

2 范围

适用于本所高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证。

3 职责

3.1 雷竞技百科 负责人批准该验证程序。

3.2 雷竞技百科 监督员负责监督该程序的实施。

3.3 检验人员负责该程序的实施，并做好相关记录。

4 程序

4.1 检验人员按该程序实施验证，做好记录，做出结果评价，上报雷竞技百科 负责人。

4.2 以上验证结果经雷竞技百科 负责人批准，以后高压蒸汽灭菌器按验证的方法操作。

5 试验步骤

高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求，这是药品实验中的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格足实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到对药品的无菌试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。为此我们提供了进行灭菌效果验证的一个简易可行的方法。

1．试验材料
(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。

嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5 CFU/片。

(2)121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。

(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。

(4)O—150℃留点温度计

2．方法与结果
将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层，则需放10处。

留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存l℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。

灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。

化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。

高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次，共做六次。

5个点六次试验表明温度均在121℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明高压蒸气灭菌效果合格。

6 验证结果与评定

验证结束后，验证人员依据试验结果对本次验证做出评价和结论，并拟定高压蒸汽灭菌器的操作规程和灭菌验证频次，上报雷竞技百科 负责人。

7 雷竞技百科 记录

7.1《高压蒸汽灭菌效果验证记录》

2、日常定期维护保养

对高压灭菌锅需进行日常定期维护保养。对于密封圈等易老化的零部件，应经常检查，如有损坏及时更换。

高压灭菌锅操作注意事项：

使用高压蒸气灭菌器时，首先应注意在开放蒸气的同时，排除灭菌器内的冷空气。必须将器内冷空气全部排除后，才可关闭排气孔。假如灭菌器内仍存留有部分空气时，刚压力表上虽已达到了某一压力值，但器内之温度仍未达到相应之度数。存留的空气越多，刚二者相差也越大。差也越大，器内温度不足，灭菌则不彻底。