01.培养基的选择
1、应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、高盐察氏培养基等。
2、如高盐察氏培养基因具有抑制细菌和减缓生长速度快的毛霉科菌种的作用,所以在粮食和食品中常见的曲霉和青霉在高盐察氏培养基上分离效果良好。
3、孟加拉红培养基因抑菌剂氯霉素的作用具有抑制细菌生长和抑制霉菌菌落蔓延生长,在菌落背面由孟加拉红产生的红色有助于霉菌和酵母菌的计数,一般包装饮用水类霉菌酵母检测时选用此培养基。
02.培养温度
经对多种常见霉菌的最适生长温度调查发现,大部分菌种的最适温度为25~30℃。但一些产曲霉毒素的菌株或动物致病菌则需要更高的温度,如黄曲霉35℃、构巢曲霉33℃、烟曲霉37℃、小孢子菌35℃。因此,培养温度也应根据培养目的而定,一般情况下都采用25~28℃培养,若有特殊培养目的,则应适当调节培养温度。
03培养时间
经过对30种常见霉菌的生长速度作了调查,有几类生长特别快、菌丝很多的菌,需在48小时以内计数,否则菌丝就会覆盖整个平皿,无法准确计数。这类菌主要有:毛霉、根霉、犁头霉、共头霉、木霉等湿度较大的样品,这类菌污染较多,检测这类样品,应提早观察记录。